限進(jìn)高效液相色譜在體內(nèi)藥物分析中的應(yīng)用研究.pdf

1、本研究為考察限進(jìn)高效液相色譜方法在體內(nèi)藥物分析中的普遍適用性，采用限進(jìn)填料結(jié)合單柱或柱切換系統(tǒng)，分別建立對(duì)極性的特布他林、非極性的替米沙坦和結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定的拓?fù)涮婵颠M(jìn)行血藥濃度測(cè)定的方法。主要研究?jī)?nèi)容如下： 1、限進(jìn)填料高效液相色譜法測(cè)定人血漿中特布他林的濃度為建立限進(jìn)高效液相色譜測(cè)定人血漿中特布他林濃度的方法，直接進(jìn)特布他林血漿樣品到液相色譜系統(tǒng)測(cè)定其濃度。色譜柱為限進(jìn)填料柱(150mm×4.6mm，5μm)；柱溫：40℃；流動(dòng)相

2、：甲醇-0.05M辛烷磺酸鈉溶液(含0.005M磷酸二氫鈉并用磷酸調(diào)pH至3.5)=5：95(v/v)；流速：0.8ml/min；進(jìn)樣量：20μl；熒光檢測(cè)λex280nm/λem309nm。平均回收率為94.50％，校正曲線線性范圍為1～40μg/ml(r=0.9996)。日內(nèi)和日間的平均RSD分別為2.53％，2.80％。最低檢測(cè)濃度為0.1μg/ml。本法準(zhǔn)確、簡(jiǎn)便、快速，適用于特布他林的血藥濃度測(cè)定及其藥動(dòng)學(xué)研究。 2、

3、柱切換限進(jìn)填料高效液相色譜法測(cè)定人血漿中替米沙坦的濃度為建立柱切換限進(jìn)高效液相色譜測(cè)定人血漿中替米沙坦?jié)舛鹊姆椒?，將血漿樣品直接進(jìn)樣，經(jīng)限進(jìn)填料預(yù)柱用甲醇-水=10：90(v/v)在線凈化并富集，然后洗脫切入C18分析柱用甲醇-水=63：37(v/v)進(jìn)行分離，熒光檢測(cè)λex302nm/λem365nm。校正曲線線性范圍10～2000ng/ml(r=0.9995)，回收率為95.4％～97.7％，日內(nèi)RSD為0.2％～2.6％，日間RS

4、D為2.1％～4.1％。最低檢測(cè)濃度為0.5ng/ml。本法可靠、簡(jiǎn)便，適用于測(cè)定人血漿中替米沙坦?jié)舛燃捌渌巹?dòng)學(xué)研究。 3、限進(jìn)高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定人血漿中拓?fù)涮婵祪?nèi)酯型和羧酸型的濃度為建立限進(jìn)高效液相色譜同時(shí)測(cè)定人血漿中拓?fù)涮婵祪?nèi)酯型和羧酸型濃度的方法，直接進(jìn)拓?fù)涮婵笛獫{樣品到液相色譜系統(tǒng)測(cè)定其濃度。色譜柱為限進(jìn)填料柱(150mm×4.6mm,5μm)；柱溫：40℃；流動(dòng)相：甲醇-0.05M磷酸鹽緩沖液(含1％三乙胺，pH6

5、.6)=13：87(v/v)；流速：1ml/min；進(jìn)樣量：20μl；熒光檢測(cè)λex390nm/λem520nm。平均回收率為94.50％，校正曲線線性范圍為20～1000ng/ml。日內(nèi)和日間RSD均不大于5％。由分析結(jié)果推得的動(dòng)力學(xué)方程顯示37℃時(shí)在人血漿中拓?fù)涮婵涤蓛?nèi)酯型轉(zhuǎn)化為羧酸型為一級(jí)動(dòng)力學(xué)過(guò)程，由此可進(jìn)一步外推出采樣時(shí)刻拓?fù)涮婵祪?nèi)酯型和羧酸型各自的濃度。本法準(zhǔn)確、快速，適用于拓?fù)涮婵祪煞N結(jié)構(gòu)的血藥濃度同時(shí)測(cè)定及其藥動(dòng)學(xué)研究。