豬模擬小腸液的制備及仿生消化法測定飼料可消化養(yǎng)分含量的研究.pdf

1、本試驗首先研究生長豬空腸液中消化酶的特性、空腸液消化酶的純化與模擬腸液的制備方法，在此基礎(chǔ)上探討了基于單胃動物仿生消化系統(tǒng)(SDS-Ⅱ)和模擬小腸液的仿生消化法測定日糧消化能和可消化氨基酸含量的可行性。從5個方面開展工作:
　　試驗一旨在研究不同生長階段及日糧條件下豬空腸液消化酶的活性，為模擬小腸液的制備參數(shù)提供參考。試驗采用2×2兩因素完全隨機設(shè)計，其中日糧設(shè)兩個水平，即玉米-豆粕型日糧和玉米-玉米干酒糟(DDGS)-米糠粕型日

2、糧，豬生長階段設(shè)兩個水平，即生長期（60-100天）和育肥期（100-140天），測定空腸液中淀粉酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶、脂肪酶的活性、總蛋白含量和pH。結(jié)果表明:日糧類型與生長階段對生長豬空腸液中各消化酶體積比活性及pH均無顯著影響(P＞0.05)，豬空腸液單位體積主要消化酶平均活性和pH分別為:淀粉酶189.79 U/ml、胰蛋白酶62.10U/ml、糜蛋白酶7.36 U/ml、脂肪酶4.91U/ml和pH6.44。
　　試驗

3、二旨在探討空腸消化液中主要消化酶的活性與日糧養(yǎng)分消化率間的相關(guān)性，為模擬腸液制備中消化酶活性的誤差控制標準提供參考。玉米-豆粕型日糧和玉米-DDGS-米糠粕型日糧分別設(shè)16個重復(fù)，每個重復(fù)1頭豬，測定日糧及糞樣的干物質(zhì)、鹽酸不溶灰分(AIA)、粗蛋白、總能及腸液中主要消化酶的活性，然后對每種日糧下的養(yǎng)分消化率與主要消化酶的活性進行簡單相關(guān)分析和典型相關(guān)分析。結(jié)果表明:1）兩種日糧下，生長豬個體間4種主要消化酶活性的變異系數(shù)均在20％以上

4、，而日糧干物質(zhì)、粗蛋白、能量消化率的變異系數(shù)均在1.5％以內(nèi);2）豬空腸液中淀粉酶、胰蛋白酶和糜蛋白酶活性與日糧養(yǎng)分消化率無顯著相關(guān)性（P＞0.05），而脂肪酶的活性與日糧養(yǎng)分消化率有一定的相關(guān)性，但對養(yǎng)分消化率變異的貢獻是有限的。
　　試驗三分為兩部分進行:首先探討豬空腸液中消化酶的純化方法，然后比較以空腸液純化粉劑制備的模擬小腸液與以試劑酶制備的模擬小腸液在消化能力上的差異。采用2×2兩因素完全隨機設(shè)計，即日糧和豬生長階段各設(shè)

5、兩個水平。采用冰乙醇沉淀-凍干純化空腸液中的消化酶，測定純化過程中消化酶的活性損失和腸液純化粉劑的比活性。然后，根據(jù)四個處理下的空腸液中消化酶的活性，以試劑酶、處理組內(nèi)腸液純化粉劑+試劑酶、所有處理腸液混合液純化粉劑+試劑酶制備模擬小腸液分別測定日糧的水解物能值(EHGE)，并與生物學(xué)法測值進行相關(guān)性分析。結(jié)果表明:1）乙醇沉淀-凍干獲得的腸液消化酶活性的回收率均在60％以上，日糧類型和生長階段對純化粉劑的消化酶活性無顯著影響;2）乙醇

6、沉淀過程中消化酶的活性損失顯著的高于凍干過程(P＜0.01);3)以腸液純化粉劑制備的模擬小腸液測定日糧的EHGE均顯著高于以試劑酶制備模擬腸液的相應(yīng)測值(P＜0.05)，且與生物學(xué)法測值的相關(guān)性更高。以上結(jié)果表明，乙醇-沉淀凍干法提純的腸液消化酶粉劑可以更好地模擬小腸液。
　　試驗四旨在研究基于胃蛋白酶-模擬豬腸液-Viscozyme復(fù)合酶的仿生消化法估測豬棉籽粕日糧的消化能值。分別采用腸液純化粉劑和試劑酶模擬豬小腸液測定11種

7、脫酚棉籽蛋白和19種棉籽粕日糧的酶水解物能值，并與生物學(xué)法測值進行簡單相關(guān)分析。結(jié)果表明:1）采用腸液純化粉劑模擬小腸液測定脫酚棉籽蛋白的表觀酶水解物能值(AEHGE)和真酶水解物能值(TEHGE)與試劑酶測值間均具有很高的相關(guān)性（P＜0.05，r=0.96）;2）采用腸液純化粉劑比試劑酶制備的模擬小腸液測定的棉籽粕日糧的酶水解物能值與生物學(xué)法測值的相關(guān)性更高(r=0.94 VS0.87)。這表明基于豬源性消化酶粉劑制備的模擬小腸液在棉