中國荷斯坦奶牛耐熱性狀的RAPD標(biāo)記研究.pdf

1、奶牛的熱應(yīng)激(Heat Stress)是指奶牛機(jī)體受到超過本身體溫調(diào)節(jié)能力的高溫刺激，作用于垂體一。腎上腺皮質(zhì)系統(tǒng)而使機(jī)體引起的非特異性防御反應(yīng)和特異性障礙在內(nèi)的全身性適應(yīng)癥。當(dāng)氣溫在 5.0℃-24℃，奶牛處在最佳生理狀態(tài)，當(dāng)氣溫上升時(shí)，為了維持正常的體溫，奶牛將降低采食量，導(dǎo)致產(chǎn)奶量下降10-25％，乳脂率及乳蛋白率下降，免疫功能下降，維持需要上升，產(chǎn)奶效率下降。 本實(shí)驗(yàn)以中國荷斯坦牛為實(shí)驗(yàn)材料，利用公畜內(nèi)半同胞相關(guān)法估算產(chǎn)

2、奶量遺傳力、耐熱產(chǎn)奶量遺傳力、紅細(xì)胞鉀遺傳力分別是0.334、0.196、0.318。研究Mg<'2+>濃度、dNTPs 濃度、模板DNA濃度、引物濃度、TaqDNA聚合酶的用量以及退火溫度對RAPD反應(yīng)的影響，建立一套適合中國荷斯坦牛較佳的RAPD反應(yīng)體系：反應(yīng)總體積為 20 μL，Mg<'2+>濃度為2.5mmol/L，TaqDNA 聚合酶1U，引物濃度為2μmol/L，dNTPs 濃度為400 μmol/L，模板DNA濃度為100

3、ng，PCR反應(yīng)程序：94℃預(yù)變性2min→40cycles(94℃變性1min→38℃退火1min→72℃延伸1min)→72℃延伸5min。對154條S系列隨機(jī)引物進(jìn)行了RAPD-PCR擴(kuò)增反應(yīng)。篩選出穩(wěn)定性好、帶型清晰的引物64條。結(jié)合紅細(xì)胞K含量和奶牛生產(chǎn)性能變化，篩選出3個(gè)與奶牛耐熱性狀相關(guān)的分子標(biāo)記，即S463和S441所擴(kuò)增的亮帶可以作為耐熱奶牛品種的兩個(gè)遺傳標(biāo)記，S93擴(kuò)增出的弱帶可以作為不耐熱奶牛品種的一個(gè)遺傳標(biāo)記。鑒