甲狀腺癌、乳腺癌中EG-1 mRNA的表達(dá)與預(yù)后的相關(guān)研究.pdf

1、目的： EG-1(endothelial derived gene-1，基因庫(kù)序列號(hào)為AF358829)是Zhang L等于2002年在研究腫瘤條件液培養(yǎng)下的臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞對(duì)照正常情況下的臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)的一種具有顯著性差異的基因。目前在甲狀腺癌方面，國(guó)內(nèi)外尚未有EG-1的相關(guān)研究。本試驗(yàn)通過(guò)RT-PCR的方法，檢測(cè)EG-1在甲狀腺癌組織中表達(dá)情況，并進(jìn)一步分析EG-1的表達(dá)和甲狀腺癌的預(yù)后的關(guān)系。判斷EG-1在評(píng)價(jià)甲狀腺癌

2、預(yù)后方面可能存在的價(jià)值。 方法： 病理標(biāo)本隨機(jī)選取山東省立醫(yī)院2000-2002年52例甲狀腺癌石蠟包埋組織塊，病理結(jié)果均經(jīng)病理科專家進(jìn)一步證實(shí)。52例甲狀腺癌標(biāo)本，其中乳頭狀癌36例，濾泡狀癌8例，未分化癌5例，髓樣癌3例。均有完整隨訪資料，隨訪截止日期為2007年5月，中位隨訪時(shí)間為70月(8-87月)。隨訪期間死于其他原因、失訪及到隨訪截止時(shí)間仍生存者，均計(jì)為刪失數(shù)據(jù)。同時(shí)取15例良性甲狀腺組織(結(jié)節(jié)性甲狀腺腫)作

3、為對(duì)照。用RT-PCR方法檢測(cè)甲狀腺癌及良性甲狀腺組織中EG-1mRNA的表達(dá)，并進(jìn)一步分析比較甲狀腺癌患者EG-1基因表達(dá)組和不表達(dá)組的生存資料。采用SPSS 10.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，甲狀腺癌與良性甲狀腺組織中EG-1mRNA表達(dá)差異比較應(yīng)用卡方檢驗(yàn)。生存資料的單因素生存分析應(yīng)用Kaplan-Meier法，采用Log-rank檢驗(yàn)，多因素分析用Cox比例風(fēng)險(xiǎn)回歸模型，Wald檢驗(yàn)，檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)均以p<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

4、結(jié)果： 1、EG-1基因在甲狀腺組織中的表達(dá)：52例甲狀腺癌組織中，38例甲狀腺癌組織中檢測(cè)到EG-1 mRNA，表達(dá)率73.08％。15例甲狀腺良性結(jié)節(jié)中，4例檢測(cè)到EG-1 mRNA，表達(dá)率為26.67％。兩者比較，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(x2=10.720，p<0.05)。 2、單因素生存曲線分析的Log-rank檢驗(yàn)，甲狀腺癌患者EG-1表達(dá)組和未表達(dá)組總生存曲線分析存在差異(p=0.025)，同時(shí)年齡、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，腫瘤分

5、期，病理類型不同組別間總生存曲線比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差別。性別間總生存曲線比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差別。 3、多因素COX回歸分析，研究發(fā)現(xiàn)EG-1表達(dá)、年齡、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤分期、病理類型均為預(yù)測(cè)甲狀腺癌生存率的獨(dú)立預(yù)后因素，其中EG-1表達(dá)組死亡風(fēng)險(xiǎn)與EG-1未表達(dá)組相比明顯增高(RR值4.947，p=0.008)。 4、本實(shí)驗(yàn)同時(shí)評(píng)估目前甲狀腺癌預(yù)后的幾個(gè)評(píng)分系統(tǒng)，通過(guò)單因素生存曲線分析的Log-rank檢驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)AMES、AGES

6、和MACIS各分組間生存曲線存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。AMES、AGES和MACIS評(píng)分系統(tǒng)在評(píng)估甲狀腺癌預(yù)后方面是可行的。 結(jié)論： 及其意義EG-1基因在甲狀腺癌中存在高表達(dá)，其表達(dá)陽(yáng)性的患者生存率差于陰性者，單因素及多因素生存分析均表明其是甲狀腺癌的一個(gè)重要預(yù)后因素，可能成為一個(gè)較好的分子生物學(xué)標(biāo)記。通過(guò)對(duì)該基因表達(dá)的檢測(cè)，有助于我們對(duì)甲狀腺癌患者的預(yù)后提供更確切地評(píng)價(jià)，從而制定合理的復(fù)診時(shí)間，指導(dǎo)我們的臨床工作。 本

7、實(shí)驗(yàn)為首次檢測(cè)甲狀腺癌中EG-1基因的表達(dá)情況，并進(jìn)行甲狀腺癌中該基因的表達(dá)與患者臨床預(yù)后的相關(guān)研究，為甲狀腺癌的預(yù)后評(píng)估提供一個(gè)可能的分子生物學(xué)標(biāo)記。為下一步研究EG-1基因在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制提供重要的研究基礎(chǔ)。 第二部分乳腺癌中EG-1 mRNA的表達(dá)與預(yù)后的相關(guān)研究 目的： 目前乳腺癌相關(guān)癌基因已經(jīng)發(fā)現(xiàn)很多，有的已經(jīng)證實(shí)在乳腺癌臨床診治中有一定價(jià)值，但始終沒(méi)有發(fā)現(xiàn)十分關(guān)鍵的基因。Liu等于2002年

8、在研究腫瘤條件液培養(yǎng)下的臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞對(duì)照正常情況下的臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)了一種具有顯著性差異的基因，他們將之命名為EG-1。其與內(nèi)皮細(xì)胞、上皮細(xì)胞的增生激活狀態(tài)相關(guān)，可能在腫瘤盤管發(fā)生中起重要作用。EG-1在乳腺癌臨床中的研究尚未有報(bào)道，本研究旨在探討其在乳腺癌中的表達(dá)情況與乳腺癌預(yù)后的相關(guān)性。 方法： 取山東省立醫(yī)院1995年lO月至1999年8月間的有完整隨訪資料的乳腺癌手術(shù)切除石蠟包埋標(biāo)本，均行根治性手術(shù)加腋窩淋

9、巴結(jié)清掃，經(jīng)病理學(xué)確診為浸潤(rùn)性乳腺癌，所有標(biāo)本均用免疫組化法檢測(cè)ER、PR。從中隨機(jī)抽取72例病歷資料及石蠟標(biāo)本，采用RT-PCR技術(shù)，檢測(cè)EG-1基因在72例乳腺癌及18例良性乳腺組織中的表達(dá)，同時(shí)采用免疫組化法測(cè)定72例乳腺癌石蠟包埋標(biāo)本p53、Her-2及VEGF蛋自表達(dá)情況。隨訪截止日期為2006年10月1日，中位隨訪89(32～123)個(gè)月。在隨訪期間，38例(52.7％）出現(xiàn)復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移(遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移25例，局部復(fù)發(fā)13鍘)，其中有

10、26例(36.1％)患者死于乳腺癌，全部病例中有4例(5％)死于心血管疾病或意夕}、等其他原因，至隨訪截至仍生存者為42例(58.3％)。隨訪期間死于其他原因、失訪或研究截止仍生存者，均計(jì)為刪失數(shù)據(jù)。采用SPSS10.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，采用Chi-square檢驗(yàn)乳腺癌與良性乳腺組織EG-1基因表達(dá)的差異，單因素生存分析應(yīng)用Kaplan-Meier法，采用LOg-rank檢驗(yàn)，多因素分析用Cox比例風(fēng)險(xiǎn)回歸模型，Wald檢驗(yàn)，檢驗(yàn)標(biāo)

11、準(zhǔn)均戩p<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果： l.72例乳腺癌組織中，5l例(71％)的乳腺癌組織中可檢測(cè)到：EG-1 mRNA，18例良性乳腺組織中，4例(24％)可檢測(cè)到EG-1 mRNA，乳腺癌組織EG-1 mRNA顯著高于良性乳腺組織(x2=17.604，p<0.01)。 2. EG-1mRNA與生存期單因素生存分析表明，EG-1表達(dá)不同的患者間總生存時(shí)間(OS)和無(wú)病生存時(shí)間(DFS)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(

12、p<0.05)。 3.Cox模型多因素回歸分析顯示，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)、EG-1mRNA、Her-2蛋自是預(yù)測(cè)總生存率和無(wú)復(fù)發(fā)生存率的獨(dú)立預(yù)后因素，而VEGF蛋白只是預(yù)測(cè)無(wú)復(fù)發(fā)生存的獨(dú)立預(yù)后因素。 結(jié)論： 及其意義EG-1基因在乳腺癌中有高表達(dá)，EG-1表達(dá)組乳腺癌患者預(yù)后差，EG-1是乳腺癌潛在的預(yù)后標(biāo)記物及治療靶點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)檢測(cè)乳腺癌中EG-1基因的表達(dá)情況，并進(jìn)一步研究乳腺癌中該基因的表達(dá)與患者臨床預(yù)后的相關(guān)研