乳牛肝菌菌種的分離、鑒定及培養(yǎng).pdf_第1頁
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文檔簡介

1、牛肝菌是森林生態(tài)系統(tǒng)中的重要生物類群之一,菌絲體與植物根系結合形成菌根,使植物生長成為可能,使不同種類植物的根系聯(lián)在一起,有助于提高森林生態(tài)系統(tǒng)中植物的多樣性、穩(wěn)定性和生產力,增加植物一土壤間的聯(lián)系,改善土壤結構,促進土壤微生物生長,增強植物器官的功能,促進造林或育苗成活與生長。牛肝菌中的許多種類是分布極廣的具有經濟價值的著名藥食兩用真菌,具有很高的營養(yǎng)價值和獨特的藥用價值。開展牛肝菌子實體的誘導和栽培研究是國內外微生物和食用菌研究人員

2、十分關注的研究課題。牛肝菌人工馴化栽培的關鍵是批量生產純菌種,其難點是難以獲得純菌種以及菌種生長速度緩慢?;诖耍疚膶θ榕8尉淖訉嶓w進行了菌種分離和分子鑒定,并研究了菌種培養(yǎng)、發(fā)酵液產酶情況以及乳牛肝菌子實體內部及附生微生物的多樣性。主要研究內容如下: 1.乳牛肝菌菌種的分離及鑒定:采用組織分離法從乳牛肝菌子實體分離得到純培養(yǎng)菌絲體,由于乳牛肝菌是外生菌根菌,無法人工栽培,而傳統(tǒng)的形態(tài)學方法難以鑒定其真?zhèn)?,故采用ITS序列分

3、析方法對其進行分子鑒定,同時構建進化樹,初步分析乳牛肝菌的系統(tǒng)發(fā)育關系。 2.乳牛肝菌菌種的培養(yǎng):對牛肝菌母種培養(yǎng)基進行篩選試驗,開展液體和固體培養(yǎng)研究。結果表明:牛肝菌母種在葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)基基上生長最好,可用此培養(yǎng)基進行乳牛肝菌的液體發(fā)酵;對多種固體培養(yǎng)基的培養(yǎng)比較實驗表明,乳牛肝菌在麥粒培養(yǎng)基上生長最好,在甘蔗渣培養(yǎng)基上長勢次之,而在其它幾種培養(yǎng)基上未生長。 3.乳牛肝菌液體培養(yǎng)的胞外酶活性研究:測定了乳牛肝菌液體

4、培養(yǎng)時的胞外酶活性,并同時與幾種白腐真菌的胞外酶活性作對比。結果表明乳牛肝菌在整個培養(yǎng)過程中不產纖維素酶、半纖維素酶和漆酶,而這幾種酶都存在于幾種白腐真菌樹舌、金針菇和靈芝中。 4.乳牛肝菌內生及附生微生物多樣性研究:用玻璃粉吸附法提取出乳牛肝菌、美味牛肝菌和硬皮馬勃子實體及根際土壤的總DNA,并以此為模板,對16srRNA基因V3區(qū)和18s I斟A基因的ITS區(qū)進行PCR擴增,用DGGE技術對PCR產物進行分離,從而得到數目不

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