紅芪總多糖抗腫瘤和抗衰老活性的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:研究紅芪總多糖(Total Hedysari Polysaccharide，THPS)抗腫瘤和抗衰老的作用，探討其作用機(jī)制。 方法:1、水提醇沉法從多序巖黃芪中提取THPS并測(cè)定其分子量、純度、糖及糖醛酸含量、單糖組成。2、90只昆明小鼠隨機(jī)分為9組，第1組作為Normal control，每天給予生理鹽水10mL·kg-1腹腔注射，后8組接種S180瘤后再重新隨機(jī)分為8組，S180control組，每天給予生理鹽水10

2、mL·kg-1腹腔注射，環(huán)磷酰胺(Cyclophosphamide，CTX)組給予CTX20mg·kg-1隔天腹腔注射，THPS100、THPS200和THPS400組分別每天給予THPS100mg·kg-1,200mg·kg-1和400mg·kg-1腹腔注射，THPS100+CTX、THPS200+CTX和HPS400+CTX組分別每天給予THPS100 mg·kg-1、200 mg·kg-1和400 mg·kg-1及隔天CTX20m

3、g·kg-1腹腔注射，14天后處死小鼠。3、測(cè)定每組小鼠的瘤重、抑瘤率、動(dòng)態(tài)瘤體大小變化、紅細(xì)胞、血紅蛋白、白細(xì)胞、血小板、胸腺指數(shù)和脾指數(shù)，流式細(xì)胞儀檢測(cè)NK細(xì)胞、CD3+、CD4+和CD8+T淋巴細(xì)胞數(shù)量及CD4+/CDs+比值，ELISA法測(cè)定每組小鼠外周血白介素2(IL-2)和腫瘤壞死因子α(TNF-α)含量，免疫組化測(cè)定每組腫瘤組織核轉(zhuǎn)錄因子κB(NF-κB)含量。4、昆明小鼠50只接種S180瘤后隨機(jī)分為5組：Normal

4、control組，每天給予生理鹽水10mL·kg-1腹腔注射，CTX組，CTX20mg·kg-1隔天腹腔注射，THPS低劑量、THPS中劑量和THPS高劑量組分別每天給予THPS100mg·kg-1、200 mg·kg-1和400mg·kg-1腹腔注射，14天后處死小鼠。5、電鏡觀察各組瘤細(xì)胞的形態(tài)，激光共聚焦(LSCM)測(cè)定每組瘤細(xì)胞DNA、RNA含量、細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度、自由基含量及線(xiàn)粒體膜電位。6、72只Wistar大鼠隨機(jī)分為6組

5、，分別為Normal control、Aging control、THPS50、THPS100、THPS200和THPS400組，分別給予Normal control和Aging control組每天生理鹽水10mL·kg-1腹腔注射，THPS的四個(gè)劑量組分別每天給予50mg·kg-1，100mg·kg-1，200mg·kg-1,400mg·kg-1mg的THPS腹腔注射，自由進(jìn)食水，56天后處死動(dòng)物。7、檢測(cè)血清和肝臟勻漿中超氧化物歧

6、化酶(SOD)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-PX)、丙二醛(MDA)含量，檢測(cè)THPS對(duì)超氧陰離子(O2-)和羥基自由基(·OH)的清除能力。 結(jié)果:1、200 mg·kg-1的THPS對(duì)小鼠S180瘤有一定的抑制作用(27.81％)且與CTX合用后有良好的協(xié)同作用(79.82％)，增高荷瘤及CTX所治療小鼠的胸腺、脾臟指數(shù)、CD3+、CD4+、CD8+、IL-2、TNF-α和NF-κB的含量作用。2、200 mg·kg-1的T

7、HPS可明顯升高細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度、自由基含量，降低線(xiàn)粒體膜電位和瘤細(xì)胞DNA、RNA含量的作用。3、200 mg·kg-1和400mg·kg-1的THPS能清除O2-和-OH，降低血清肝臟勻漿中MDA含量，增加血清和肝臟勻漿中SOD和GSH-PX的作用，以400mg·kg-1的THPS的效果最好，具有劑量的依耐性。 結(jié)論:1、200 mg·kg-1的THPS通過(guò)增高荷瘤及環(huán)磷酰胺所治療小鼠的胸腺、脾臟指數(shù)、CD3+、CD4+、C