鮰魚皮明膠多肽抗衰老活性的研究.pdf

1、在水產(chǎn)品加工過程會產(chǎn)生大量的廢棄物,其中魚皮富含膠原蛋白(多肽)。明膠是膠原多肽經(jīng)溫和但不可逆的斷裂后生成的主要產(chǎn)物。本論文以鲴魚皮為原料,采用熱水抽提法制備鲴魚皮明膠,研究了鮰魚皮明膠的復(fù)合酶解工藝、鮰魚皮明膠多肽的體外抗氧化、體內(nèi)抗衰老活性和抗氧化穩(wěn)定性,為水產(chǎn)品加工廢棄物的綜合利用開辟出了一個新的途徑。主要結(jié)果如下:
　　 (1)將鮰魚皮經(jīng)過脫脂、酸堿前處理后用45℃熱水抽提6h,得到鮰魚皮明膠。采用胃蛋白酶、胰蛋白酶、堿

2、性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶將鮰魚皮明膠進行酶解,根據(jù)酶解液對·OH的清除效果,確定了胰蛋白酶和胃蛋白酶作為水解明膠用酶。以水解液對·OH的清除率為指標(biāo),通過正交試驗L9(34),確定了胰蛋白酶單獨水解鮰魚皮明膠的最佳酶解工藝:溫度40℃、pH7.5、酶與底物質(zhì)量濃度比([E]/[S])3.5/100、底物質(zhì)量濃度2.5g/100mL。在胰蛋白酶最適酶解工藝條件的基礎(chǔ)上,采用胰蛋白酶和胃蛋白酶進行復(fù)合水解,得到最佳復(fù)合酶解工藝:先用

3、胰蛋白酶酶解3h,然后用胃蛋白酶酶解3h,此時得到的酶解液羥自由基清除率最高,達到47.38％。
　　 (2)對最佳復(fù)合酶解工藝條件下所制備的鲴魚皮明膠酶解液的體外抗氧化活性進行了測定。實驗結(jié)果表明酶解液對·OH、·O2-、DPPH·和H2O2均有較好的清除作用,還具有一定的還原能力,對Fe2+誘發(fā)的卵黃脂蛋白的過氧化有較好的抑制作用?？傮w而言,鮰魚皮明膠酶解液在不同抗氧化體系中都表現(xiàn)出一定的抗氧化效果,具有很好的開發(fā)利用前景。

4、
　　 (3)將鮰魚皮明膠酶解液進行超濾,并對超濾各組分清除自由基的活性進行測定,結(jié)果表明分子量1000Da以下組分清除自由基活性最高,將此部分液體收集用于下一步小鼠的體內(nèi)抗氧化試驗。采用D-半乳糖誘導(dǎo)的衰老小鼠模型,對鮰魚皮明膠水解液的體內(nèi)抗衰老活性進行了研究。對實驗小鼠灌胃給藥不同濃度的鮰魚皮明膠多肽,飼養(yǎng)42天后,分別測定小鼠血清中MDA的含量,SOD的活力和小鼠腦組織、肝組織中MDA含量,SOD、GSH-Px的活力。實驗

5、結(jié)果表明鮰魚皮明膠多肽可以顯著提高衰老小鼠血清SOD活力和腦組織、肝組織SOD、GSH-Px活力;降低衰老小鼠血清和肝組織、腦組織中MDA含量。同時,鮰魚皮明膠多肽的抗衰老活性隨給藥劑量提高而增強。
　　 (4)對鮰魚皮明膠多肽的抗氧化穩(wěn)定性進行了初步研究,實驗結(jié)果表明:鮰魚皮明膠多肽具有較強的耐熱性,加熱到100℃,活性仍保持在90％左右;在pH2-9的環(huán)境中清除自由基活性保持較好,其中pH2和pH3時活性保持率接近100％,