紅芪多糖的提取及其抗腫瘤作用的實驗研究.pdf

1、目的:從紅芪中分離提取紅芪多糖，并對其含量進(jìn)行測定。探討紅芪多糖對人胃癌MGC-803細(xì)胞抑制作用及其誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的作用。 方法:用水提醇沉法粗提，Sevag法去蛋白，乙醇分級分離，SephadexG-200柱層析純化紅芪多糖，苯酚-硫酸分光光度法測定多糖含量。用MTT法測定紅芪多糖對MGC-803細(xì)胞的抑制作用，熒光顯微鏡，電子顯微鏡，流式細(xì)胞儀技術(shù)觀察和檢測細(xì)胞凋亡。 結(jié)果: 1.提取純化的是單一均勻的多

2、糖，多糖含量平均結(jié)果94.88﹪，RSD=1.05﹪。 2.1.0-4.0mg/ml的紅芪多糖對體外培養(yǎng)的MGC-803細(xì)胞有明顯的抑制作用，與對照組相比有明顯差異(P<0.05)，其抑制作用隨作用時間和多糖濃度增加而增加，呈時效，量效依賴關(guān)系。 3.熒光顯微鏡下凋亡細(xì)胞表現(xiàn)為細(xì)胞核呈致密濃染，藍(lán)色的細(xì)胞核顏色有些發(fā)白，有的核染色固縮成高凝集的點(diǎn)狀結(jié)構(gòu)，形成凋亡小體。透射電鏡下凋亡細(xì)胞表現(xiàn)為細(xì)胞固縮，核染色質(zhì)邊集，形成新

3、月狀體，胞質(zhì)空泡化，凋亡小體形成等。 4.流式細(xì)胞儀檢測Sub-G<,1>凋亡峰在G<,1>期前出現(xiàn)，G<,0>/G<,1>期細(xì)胞比例增高，與對照組相比有明顯差異(P<0.05)。 結(jié)論: 1.紅芪多糖對體外培養(yǎng)MGC-803細(xì)胞生長有抑制作用，可能通過阻止細(xì)胞周期的進(jìn)程，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。其作用與阻滯細(xì)胞周期于G<,0>/G<,1>期有關(guān)。 2.柱層析法分離多糖可彌補(bǔ)乙醇分級沉淀精確度低的不足，苯酚-硫