細胞內(nèi)鈣超載、細胞骨架與腸上皮細胞損傷防治研究.pdf

1、本文采用體外原代培養(yǎng)胎鼠IEC，建立人工細胞基底膜，模擬缺血缺氧損傷及采用鈣通道阻斷劑觀察IEC脫落、凋亡與細胞內(nèi)鈣含量的關(guān)系，探索細胞內(nèi)鈣超載引起細胞骨架、細胞膜蛋白、基因表達的改變和鈣通道阻斷劑的影響。 方法：將胎鼠IEC分離與原代培養(yǎng)；建立人工基底膜，然后進行缺血缺氧環(huán)境模擬；再分為：對照組(A組)，缺氧組(B組)，缺血組(C組)，缺血缺氧組(D組)；各組在實驗條件下2h后進行檢測；檢測指標為細胞脫落率、細胞凋亡率、細胞骨

2、架、鈣通道電流、細胞內(nèi)鈣含量、膜蛋白運動及構(gòu)像。最后抽提細胞的mRNA，逆轉(zhuǎn)錄熒光標記mRNA，采用大鼠基因表達譜芯片檢測各組IEC基因表達譜，并對比分析檢測結(jié)果。 結(jié)論：缺血缺氧損傷后，IEC出現(xiàn)脫落、凋亡，細胞骨架F-actin、talin和α-actin的形態(tài)、分布及熒光強度均發(fā)生變化，尤以缺血缺氧聯(lián)合損傷為重；一些與凋亡相關(guān)的基因發(fā)生了差異表達；膜蛋白的變化及鈣通道的開放可能是引起鈣超載的原因；利用鈣通道阻斷劑可降低細胞內(nèi)