神經(jīng)生長因子介導心理應激內臟高敏感形成的機制研究.pdf

1、研究目的: 腸易激綜合征(irritable bowel syndrome,IBS)是常見的功能性胃腸病(functionalgastrointestinal disorders,FGIDs),目前認為內臟高敏感是IBS的重要病理生理機制之-。神經(jīng)生長因子(nerve growth factor,NGF)是一種由機體自身分泌的神經(jīng)內分泌激素,它具有多種生物學效應,已廣泛應用于臨床。研究結果表明,NGF是促發(fā)幼鼠母嬰分離應激后內臟

2、高敏感的重要介質之一,據(jù)此我們推測NGF在成年大鼠應激致內臟高敏感過程中也發(fā)揮重要作用。而P2X3受體和TRPV1受體參與并調控外周與內臟傷害性信息的傳遞,但它們在內臟高敏感大鼠中的作用尚不十分明確。本研究采用腹腔注射NGF和/或避水應激來了解NGF在大鼠內臟高敏感形成中所起的作用以及P2X3受體和TRPV1受體在其中所起的作用。 研究方法： 以腹腔注射NGF和/或慢性避水(water avoidance,WA)應激方法

3、建立內臟高敏感大鼠模型,應用電生理記錄儀記錄結直腸擴張(colorectal distention,CRD)時大鼠腹壁肌電圖(electromyographic,EMG)的改變,并以EMG的曲線下面積反映內臟運動反射(visceromotor response,VMR)的強弱。以免疫熒光組織化學染色方法檢測大鼠背根神經(jīng)節(jié)(dorsal root ganglion,DRG)P2X3受體和TRPV1受體的改變,并計數(shù)P2X3受體和TRPV1

4、受體的百分數(shù)。 結果: 各組大鼠造模前CRD時VMR無明顯統(tǒng)計學差異(P>0.05)。造模后N組和W組在各壓力CRD時的VMR值與C組相比均無統(tǒng)計學差異(P>0.05);NW組在CRD壓力為80mmHg時,與對照組相比VMR具有顯著差異(P=0.012);NW組在CRD壓力為20、40和60mmHg時的VMR值與C組相比無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。熒光顯微鏡下可見L1、L2背根神經(jīng)節(jié)內分布有多個P2X3和TRPV1熒光

5、陽性細胞,為胞漿或胞膜表達,分別呈綠色熒光和紅色熒光,以中、小型細胞免疫強度較大。陽性細胞計數(shù)并經(jīng)雙因素方差分析,避水應激可以上調P2X3受體表達(P=0.014)而與TRPV1受體表達無相關性(P=0.116);應用NGF可以上調TRPV1受體表達(P=0.002)而與P2X3受體表達無相關性(P=0.514)。 結論: 應用NGF后,可以加強避水應激對大鼠內臟高敏感的形成作用。在NGF介導的慢性避水應激大鼠內臟高敏感