甲乙肝聯(lián)合疫苗中甲肝乙肝抗原相互作用機制的探索研究.pdf

1、甲型肝炎(甲肝)和乙型肝炎(乙肝)是最常見的病毒性肝炎，它們是嚴重危害公眾健康的傳染病。其中乙肝病毒(hepatitisBviral)感染可以發(fā)展成慢性肝病、肝硬化或肝細胞癌。甲肝病毒(hepatitisAviral)感染一般不會引起慢性肝病，少數(shù)成人患者病情遷延或復(fù)發(fā)，個別患者病程可達六個月以上，預(yù)后較差。盡管甲肝和乙肝的主要傳播途徑不同，但近年來有大量報道，肝炎患者有相當一部分人同時感染甲肝和乙肝。因此，預(yù)防甲肝和乙肝對控制病毒性肝

2、炎的感染和流行尤為重要。正因為甲肝和乙肝對人類健康危害很大，而且目前尚無特效藥物治療，所以甲肝、乙肝疫苗的廣泛應(yīng)用可對甲肝乙肝病毒的流行起到非常重要的遏制作用。近年來，研制和使用含有兩種或多種抗原，可以預(yù)防兩種或多種疾病的聯(lián)合疫苗受到世界各國的重視，已成為疫苗開發(fā)的熱點。聯(lián)合疫苗為兒童免疫規(guī)劃的連續(xù)、簡化和擴大所必需。甲乙型肝炎聯(lián)合疫苗(CombinedHepatitiesAandBvaccine)是具有甲、乙型肝炎雙重特異性保護性能，

3、同時預(yù)防這兩種疾病的一種聯(lián)合疫苗。目前，在甲乙肝聯(lián)合疫苗的研究中表明，甲乙型肝炎聯(lián)合疫苗誘導(dǎo)機體產(chǎn)生的抗體水平高于單價疫苗。研究者們普遍認為采用聯(lián)合疫苗接種比單價苗接種能誘導(dǎo)機體產(chǎn)生更好的乙肝反應(yīng)，推測兩種抗原可能相互作用互為佐劑，但尚無系統(tǒng)的免疫學研究的報道。 本實驗通過對不同配比的實驗性甲乙肝聯(lián)合疫苗和單價苗免疫小鼠后的四個指標的檢測：流式細胞儀檢測細胞因子水平和T細胞亞群分型，MTT法測脾細胞增殖水平，ELISA法檢測抗體

4、水平，來評估聯(lián)合疫苗的細胞及體液免疫情況，以此衡量免疫應(yīng)答的性質(zhì)，評估免疫記憶效果，最終獲得兩種疫苗的最佳配比，并以此進一步分析甲乙聯(lián)合疫苗中兩種抗原的相互作用機制，同時也期望更全面的了解甲乙肝聯(lián)合疫苗的免疫原性。 我們采用醫(yī)學生物學研究所生產(chǎn)的甲肝滅活疫苗和深圳康泰生物制品公司生產(chǎn)的基因工程重組乙肝酵母疫苗半成品，以640Eu/ml甲肝抗原與10ug和20ug的乙肝表面抗原進行配比混合。不同配比的聯(lián)合疫苗與單價疫苗分別于BAL

5、B/C小鼠腓腸肌接種各200μl/只。每組5只小鼠，于接種后第4周，再經(jīng)腓腸肌注射相同的疫苗，加強免疫1次，200μl/只。初次免疫后1、2、3、4周和加強免疫后2周，分別檢測體液和細胞免疫情況。 結(jié)果表明：甲乙肝聯(lián)合疫苗均顯示出能刺激小鼠產(chǎn)生較單價苗更強的免疫應(yīng)答。在初次免疫的早期，加入甲肝抗原在一定程度上增強了乙肝疫苗的細胞免疫原性，起到了佐劑的作用。綜合分析本試驗的結(jié)果，我們得出的結(jié)論是我所自主研制的甲乙肝聯(lián)合疫苗640E