IFn-tau通過NF-κB信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路調(diào)節(jié)金葡菌誘導(dǎo)的小鼠子宮內(nèi)膜炎癥的應(yīng)答.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、子宮內(nèi)膜炎通常是子宮內(nèi)膜的炎癥病理變化,我國該病的發(fā)病率普遍偏高,約為20%-40%,其流行范圍廣,影響母畜的受孕和產(chǎn)奶量,加大飼養(yǎng)成本和淘汰率,加大了養(yǎng)殖業(yè)的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。金葡菌是臨床上導(dǎo)致該疾病的主要致病菌。臨床上主要使用抗生素進(jìn)行治療金葡菌引起的子宮內(nèi)膜炎,但是其耐藥性及藥物殘留可能會導(dǎo)致嚴(yán)重的食品安全問題。由于直接使用奶牛進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究耗費(fèi)過多,且不符合實(shí)驗(yàn)機(jī)制研究需求。本實(shí)驗(yàn)主要通過使用微量進(jìn)樣器對小鼠的子宮灌注一定量的金葡菌,制造

2、小鼠子宮內(nèi)膜炎模型。探究反芻動物的特異的IFN-tau是否對子宮內(nèi)膜炎癥具有調(diào)節(jié)作用,進(jìn)一步闡明子宮內(nèi)膜炎的發(fā)生機(jī)制,最終目的是為臨床上奶牛子宮內(nèi)膜炎的治療提供新的藥物靶標(biāo)和藥物篩選。
  根據(jù)干擾素的分類方法,將IFN-tau劃分為Ⅰ型干擾素,其具備的生物學(xué)功能包括抗黃體溶解、抗病毒以及免疫調(diào)節(jié)等。除此之外,IFN-tau還具有低細(xì)胞毒性的特征。Toll樣受體2(TLR2),是機(jī)體免疫防御系統(tǒng)中的一種模式識別受體(PRR),其參

3、與宿主識別金葡菌,并且通過激活NF-KappaB(NF-κB)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路激發(fā)動物組織的炎性應(yīng)答反應(yīng)?;加凶訉m內(nèi)膜炎的患畜,其子宮細(xì)胞外基質(zhì)也會產(chǎn)生一些列變化,如基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP9)及其天然組織抑制劑TIMP1。本實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)動物是選取了40只健康的雌性BALB/c小鼠,隨機(jī)分成4組,分別是空白對照組,金葡菌組,IFN-tau對照組與IFN-tau處理組。金葡菌組和IFN-tau處理組的小鼠都進(jìn)行金葡菌誘導(dǎo)的子宮內(nèi)膜炎造模處理,空

4、白對照組與IFN-tau對照組同時使用生理鹽水采用相同的方式進(jìn)行對照。造模24h后,IFN-tau對照組和IFN-tau處理組的小鼠分別腹腔注射8ng/g IFN-tau(0,8,16h),最后收集子宮樣品。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:
  1.IFN-tau可以有效的降低金葡菌感染的子宮組織的炎癥反應(yīng),保護(hù)子宮組織,但是其對金葡菌沒有殺滅作用。為了進(jìn)一步確證實(shí)驗(yàn)結(jié)果,本實(shí)驗(yàn)過程中分離培養(yǎng)小鼠子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞(mEECs),給予金葡菌刺激后添加

5、IFN-tau,結(jié)果與動物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致。
  2.為了進(jìn)一步研究IFN-tau的作用機(jī)制,本實(shí)驗(yàn)深入研究了相關(guān)的調(diào)節(jié)信號蛋白。結(jié)果表明IFN-tau顯著抑制TLR2的表達(dá),這將影響其下游與之相關(guān)信號通路的激活。我們研究其下游的NF-κB信號通路顯示,IFN-tau可顯著降低磷酸化的IκBα和P65蛋白的表達(dá)水平,同時抑制IL-1β,TNF-α和IL-6的表達(dá)。
  3.為了觀察子宮細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)的變化,本實(shí)驗(yàn)通過q

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