可樂(lè)定對(duì)原代培養(yǎng)大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元氧糖剝奪及興奮性毒性損傷的改善作用.pdf

1、目的：研究可樂(lè)定（clonidine）(1、3、10μM)對(duì)原代培養(yǎng)大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元氧糖剝奪損傷及NMDA損傷的改善作用及其機(jī)制的探討；研究可樂(lè)定對(duì)正常大鼠海馬CA1 區(qū)突觸可塑性的影響。
　　 方法：采用原代培養(yǎng)第八天的大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元，預(yù)給予可樂(lè)定（1，3，10μM）通過(guò)化學(xué)性缺氧、孵育液缺糖的方法建立神經(jīng)元的OGD損傷模型；通過(guò)NMDA濃度為100μM的無(wú)鎂孵育液孵育12h，建立神經(jīng)元的NMDA損傷模型。神經(jīng)元損傷程度采用MT

2、T染色法和檢測(cè)LDH的釋放量來(lái)進(jìn)行評(píng)價(jià)?？蓸?lè)定（50，100μg/kg）對(duì)正常大鼠海馬突觸可塑性的影響通過(guò)記錄大鼠海馬Schaffer纖維-CA1 通路的長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)（LTP）而實(shí)現(xiàn)。
　　 結(jié)果：1可樂(lè)定對(duì)OGD損傷原代培養(yǎng)大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元MTT染色及LDH釋放量的影響：正常對(duì)照組MTT染色細(xì)胞百分存活率為（100±32.12）%，LDH的百分釋放量為（100±37.51）%。與正常組比較，OGD組MTT染色A570明顯減小，顯著

3、降低細(xì)胞存活率（p<0.01）；LDH的釋放量則顯著升高（p<0.01）。與OGD組比較，可樂(lè)定（1，3，10μM）可以明顯升高A570，顯著提高細(xì)胞的百分存活率；LDH的釋放量也顯著降低。2可樂(lè)定對(duì)NMDA損傷原代培養(yǎng)大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元MTT染色及LDH釋放量的影響：正常對(duì)照組MTT染色細(xì)胞百分存活率為（100±19.46）%，LDH的百分釋放量為（100±18.46）%。與正常組比較，模型組MTT染色A570明顯減小，細(xì)胞存活率顯著降低

4、（p<0.01）；LDH的釋放量顯著升高（p<0.01）?？蓸?lè)定（1，3，10μM）可以明顯升高A570，顯著提高細(xì)胞的百分存活率；LDH的釋放量也顯著降低。3可樂(lè)定對(duì)正常大鼠海馬CA1 區(qū)突觸可塑性的影響：正常生理鹽水對(duì)照組在給予強(qiáng)直刺激后120min內(nèi)PS相對(duì)幅值穩(wěn)定在基線值的（163±44.03）%（n=5），即說(shuō)明LTP誘導(dǎo)成功?？蓸?lè)定高、低劑量組（50，100μg/kg）均使LTP被明顯抑制，其PS幅值在強(qiáng)直刺激后各時(shí)間點(diǎn)均顯

5、著低于正常組（p<0.01），低、高劑量在強(qiáng)直刺激后120min內(nèi)PS相對(duì)幅值平均分別為（132.74±6.72）%(n=5)；（118±11.01）%（n=5）；高劑量組強(qiáng)直刺激后120min內(nèi)PS相對(duì)幅值顯著低于低劑量組（p<0.05）。
　　 結(jié)論：1.可樂(lè)定（1，3，10μM）對(duì)OGD損傷及興奮毒性損傷的原代培養(yǎng)大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元具有明顯的保護(hù)作用，該作用可能與降低谷氨酸受體過(guò)度興奮引起的興奮性中毒有關(guān)。2.可樂(lè)定（50，1