?；撬釋﹀i致原代培養(yǎng)海馬神經(jīng)元毒性的干預(yù)作用研究.pdf

1、目的：應(yīng)用新生大鼠海馬神經(jīng)元體外原代培養(yǎng)的方法，探討錳致海馬神經(jīng)元的神經(jīng)毒性損害及?；撬岬母深A(yù)作用。 方法：取SPF級新生24小時內(nèi)的Wistar大鼠大腦海馬作神經(jīng)元原代培養(yǎng)，培養(yǎng)至最佳狀態(tài)，尼氏染色鑒定神經(jīng)細(xì)胞后，用于實(shí)驗(yàn)。將培養(yǎng)細(xì)胞分組為：①空白對照組；②單獨(dú)染錳組，設(shè)計(jì)為低、中、高三個劑量組，錳添加終濃度分別為0.2mM、0.8mM和1.2mM，分別記為MI、M2、M3；③牛磺酸對照組，設(shè)計(jì)為低、中、高三個劑量組，?；撬崽?/p>

2、加劑量分別為5mM、10mM和20mM，分別記為TI、T2、T3；④牛磺酸干預(yù)組，錳及?；撬崽砑觿┝堪锤髯缘牡?、中、高濃度分別進(jìn)行組合，細(xì)分為九個濃度組。各處理組在施加處理因素后24小時終止培養(yǎng)，檢測以下指標(biāo)：MTT比色試驗(yàn)檢測神經(jīng)元OD值，LDH實(shí)驗(yàn)檢測神經(jīng)元LDH活力，細(xì)胞凋亡-Hoechst染色觀察神經(jīng)細(xì)胞凋亡染色質(zhì)的形態(tài)學(xué)變化及半定量檢測凋亡率，F(xiàn)CM定量檢測細(xì)胞凋亡率，光鏡下觀察神經(jīng)細(xì)胞的形態(tài)學(xué)改變，透射電鏡觀察神經(jīng)細(xì)胞的超微