肝素修飾物對經(jīng)fibrinogen參與的腫瘤細胞與血小板間相互作用的抑制研究.pdf

1、惡性腫瘤是目前威脅人類健康的主要疾病之一。腫瘤惡性化的主要特征是轉(zhuǎn)移，其中血源性轉(zhuǎn)移是主要途徑，這個過程是復(fù)雜的多步驟和多環(huán)節(jié)的。其中進入血液循環(huán)系統(tǒng)中的腫瘤細胞與血小板形成“微血栓”是腫瘤細胞通過血源轉(zhuǎn)移形成轉(zhuǎn)移灶必不可少的步驟。在“微血栓”形成過程中，血漿蛋白、細胞上的各種粘附分子，尤其是選擇素和整合素，發(fā)揮著重要作用。目前的研究結(jié)果表明，fibrinogen、凝血酶等對腫瘤細胞和血小板的相互作用起到促進作用，對轉(zhuǎn)移灶的形成也起到關(guān)

2、鍵作用。但是，它們是怎樣參與腫瘤細胞與血小板間的相互作用，篩選有效的抑制劑用以拮抗這種相互作用一直抗腫瘤研究關(guān)注的問題。 臨床上廣泛應(yīng)用的抗凝血藥物——肝素，也被臨床上用作癌癥病人術(shù)后輔助治療的抗轉(zhuǎn)移藥物，并已被證明在多方面有抗腫瘤轉(zhuǎn)移的能力。但是肝素的抗凝血活性帶來的潛在出血危險限制了它在抗腫瘤轉(zhuǎn)移方面的應(yīng)用。于是，人們利用化學(xué)修飾的方法制備了多種具有低抗凝血活性的肝素，并通過體內(nèi)和體外的實驗證明，這些具有低抗凝血活性的肝素修

3、飾物能有效的抑制腫瘤轉(zhuǎn)移。 在本研究中，我們選取了小鼠黑色素瘤細胞系B16F10和人惡性黑色素瘤細胞系A(chǔ)375，系統(tǒng)地分析了這兩種腫瘤細胞系與fibrinogen，及經(jīng)fibrinogen預(yù)孵育后與單一的血小板在靜止和流動狀態(tài)下的相互作用，以及肝素和低抗凝血肝素修飾物對這種相互作用的抑制。結(jié)果表明，B16F10和A375這兩種腫瘤細胞能夠與fibrinogen在靜止和層流條件下結(jié)合，能夠通過fibrinogen的作用增強與血小板

4、間的相互作用；肝素以及肝素修飾物可以顯著的抑制瘤細胞與fibrinogen，及經(jīng)fibrinogen預(yù)孵育后與血小板間的粘附。通過對不同修飾物抑制效果的比較，我們得出，CR—Heparin和2/3ODS—Heparin的綜合效果最好。 為了進一步分析其中的機制，我們通過特異性的單克隆抗體標記、阻斷性抗體抑制及流式細胞儀分析，證明腫瘤細胞上高表達的β3整合素、αvβ3整合素和血小板上豐富的α11bβ3整合素起到關(guān)鍵的作用。