細(xì)胞因子基因多態(tài)性與乙腦滅活疫苗抗體反應(yīng)及HCV慢性感染相關(guān)性研究.pdf

1、背景:
　　細(xì)胞因子充當(dāng)免疫細(xì)胞間的信使分子，而在機(jī)體固有免疫與適應(yīng)性免疫中發(fā)揮重要作用。Th1細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子TNF-α，IL-2，IFN-γ等參與細(xì)胞免疫及遲發(fā)型超敏反應(yīng)，在機(jī)體抗細(xì)胞內(nèi)微生物感染和細(xì)胞免疫所引起的炎癥反應(yīng)中發(fā)揮重要作用;Th2細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子IL-4、IL-5、IL-10等參與體液免疫，在抗胞外微生物和寄生蟲感染免疫，以及變態(tài)反應(yīng)中發(fā)揮重要作用。機(jī)體細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)受到嚴(yán)密控制，細(xì)胞因子的表達(dá)與功能受基因多態(tài)

2、性位點(diǎn)的調(diào)節(jié)，近年來(lái)發(fā)現(xiàn)這些多態(tài)性位點(diǎn)與一些自身免疫病，病毒感染過(guò)程，以及疫苗抗原誘導(dǎo)的免疫反應(yīng)過(guò)程密切相關(guān)。
　　宿主遺傳因素是影響疫苗免疫反應(yīng)的重要因素。在不同個(gè)體中，相同的疫苗所誘導(dǎo)的免疫應(yīng)答也是不一致的。然而，有關(guān)這方面的研究多集中于乙肝，麻疹，天花等誘導(dǎo)的免疫應(yīng)答水平相對(duì)較低的疫苗。而在一些免疫原性較好的傳統(tǒng)滅活疫苗中，宿主遺傳因素的效應(yīng)常常被忽視。因此，本研究從細(xì)胞因子基因多態(tài)性位點(diǎn)著手，探究其與乙腦滅活疫苗的體液免疫

3、是否相關(guān)。
　　此外，多項(xiàng)研究表明，細(xì)胞因子基因多態(tài)性同樣影響著病原的感染進(jìn)程。丙型肝炎病毒（hepatitis C virus，HCV）感染后，80％人群發(fā)展為慢性感染。在病毒感染過(guò)程中，機(jī)體的天然免疫、固有免疫、適應(yīng)性免疫對(duì)病毒的清除具有重要作用。其中，Th1類細(xì)胞因子TNF-α，IL-2，IFN-γ介導(dǎo)細(xì)胞免疫過(guò)程對(duì)HCV的清除尤為重要。因此，本文進(jìn)行的Th1類細(xì)胞因子TNF-α，IL-2基因多態(tài)性位點(diǎn)與HCV慢性感染相關(guān)性

4、研究，可能為臨床診斷及治療提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。
　　方法:
　　第一部分:以525名乙腦滅活疫苗接種兒童為研究對(duì)象，采用Taqman探針基因分型方法檢測(cè)細(xì)胞因子TNF-α基因rs1800629(-308，G/A)，rs3093668(G/C)，rs3093726(T/C); IL-2基因rs11932411(A/G),rs11575812(A/G),rs2069762(-330,A/C), rs2069763(-34, T/G),

5、 rs4833248(-2811, A/G); IL-4基因rs2243247(-1138,G/A), rs2243248(-1100, A/C), rs2243250(-590, T/C), rs2070874(-33, C/T),rs2227284(2979， T/G)，rs2243291(C/G)，rs2243292(A/G);以及IL-10基因rs1800896(-1082，A/G)，rs1800871(-819，T/C)，rs

6、1800872(-592，A/C)共18個(gè)位點(diǎn)的基因多態(tài)性，DNA測(cè)序驗(yàn)證，構(gòu)建單倍型，評(píng)估細(xì)胞因子多態(tài)性位點(diǎn)與乙腦滅活疫苗免疫反應(yīng)的相關(guān)性。
　　第二部分:以云南地區(qū)HCV慢性感染者380名，正常對(duì)照367名為研究對(duì)象，采用TaqMan探針基因分型方法對(duì)TNF-α基因rs1800629(-308，G/A)，rs3093668(G/C), rs3093726(T/C) IL-2基因rs11575812(A/G), rs206976

7、2(-330, A/C),rs2069763(-34，T/G)，rs4833248(-2811，A/G)共7個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)進(jìn)行基因分型，構(gòu)建單倍型，評(píng)估細(xì)胞因子多態(tài)性位點(diǎn)與HCV慢性感染相關(guān)性。
　　結(jié)果:
　　(1)在乙腦疫苗接種的免疫應(yīng)答研究中，IL-2基因rs11932411(A/G)，IL-4基因rs2243247(-1138，G/A)，rs2243292(A/G)在研究人群中不存在多態(tài)性。攜帶IL-10基因rs180

8、0896(-1082，A/G)位點(diǎn)基因型GG的人群，其乙腦幾何平均抗體滴度顯著高于攜帶AA+AG基因型的人群（P＜0.05）。在亞層分析中，1-6歲年齡組，攜帶TNF-α基因rs1800629(-308，G/A)位點(diǎn)AG基因型的人群，其乙腦幾何平均抗體滴度及陽(yáng)轉(zhuǎn)率都顯著低于攜帶AA+GG基因型的人群(P＜0.05);7-12歲年齡組，攜帶IL-4基因rs2227284(2979，T/G)位點(diǎn)TG基因型的人群，其乙腦幾何平均抗體滴度顯著低

9、于攜帶GG+TT基因型的人群(P＜0.05）;在女性中，攜帶IL-2基因rs11575812(A/G)位點(diǎn)等位基因A的人群，其陽(yáng)轉(zhuǎn)率顯著低于攜帶等位基因G的人群(P＜0.05），攜帶IL-4基因rs2227284(2979，T/G)位點(diǎn)基因型TG的人群，其乙腦幾何平均抗體滴度顯著低于攜帶GG+TT基因型的人群（P＜0.05）。
　　(2)在HCV慢性感染研究中，IL-2基因rs2069762(-330，A/C) CC基因型頻率在H

10、CV慢性感染組顯著高于正常對(duì)照組(0.161 vs0.101，P＜0.05)，rs2069763(-34，T/G)等位基因G的頻率在HCV慢性感染組顯著高于正常對(duì)照組(0.563 vs0.511，P＜0.05)，IL-2基因rs11575812-rs2069762-rs2069763-rs4833248構(gòu)建的單倍型AATG在HCV慢性感染組中的頻率顯著低于正常對(duì)照組(P＜0.05)，IL-2基因的另外兩個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)rs11575812(

11、A/G)，rs4833248(-2811，A/G)的基因、等位基因以及TNF-α基因rs1800629(-308，G/A)，rs3093668(G/C)和rs3093726(T/C)位點(diǎn)的基因、等位基因、單倍型頻率在HCV慢性感染組和正常對(duì)照組中均無(wú)顯著差異性(P＞0.05）。
　　結(jié)論:
　　(1) IL-10基因rs1800896位點(diǎn)多態(tài)性與乙腦滅活疫苗的體液免疫應(yīng)答水平相關(guān)。年齡、性別業(yè)層分析中，TNF-α基因rs18

12、00629位點(diǎn)，IL-2基因rs11575812位點(diǎn)以及IL-4基因rs2227284位點(diǎn)多態(tài)性與乙腦滅活疫苗體液免疫反應(yīng)水平相關(guān)，說(shuō)明細(xì)胞因子多態(tài)性位點(diǎn)效應(yīng)可能受年齡，性別因素影響。
　　(2) IL-2基因SNPrs2069762 CC基因型和rs2069763 G等位基因可能是HCV慢性感染的易感因素，rs1157582-rs2069762-rs2069763-rs4833248單倍型AATG可能是HCV慢性感染的保護(hù)性因素