抗氧化劑對阿爾茨海默病的神經(jīng)保護作用及其機制的研究.pdf

1、第一部分:抗氧化劑普羅布考治療阿爾茨海默病的臨床研究
　　目的:比較普羅布考聯(lián)合多奈哌齊與單用多奈哌齊治療阿爾茨海默病的療效。
　　方法:收集40例阿爾茨海默病患者以單盲對照法，隨機分為聯(lián)合用藥治療組與單藥治療組，隨訪時間窗達8周，在治療前及治療第8周末采用簡易智能精神狀態(tài)量表(MMSE)測定認知功能，評定臨床療效。
　　結(jié)果:治療8周末MMSE評分:聯(lián)合用藥治療組與治療前比較，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01);單藥治

2、療組與治療前比較，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05);治療8周末兩組比較，差異無統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　結(jié)論:普羅布考聯(lián)合多奈哌齊能更好地改善阿爾茨海默病的認知功能。
　　第二部分:木犀草素對阿爾茨海默病體外模型的神經(jīng)保護作用及其機制的研究
　　目的:探討木犀草素(Luteolin)對以Aβ25-35誘導人神經(jīng)母細胞瘤細胞（SH-SY5Y細胞）創(chuàng)建的阿爾茨海默體外模型氧化損傷的神經(jīng)保護機制。
　　方法:以

3、50μmol/L濃度Aβ25-35誘導SH-SY5Y細胞，建立阿爾茨海默體外模型。以不同濃度劑量的木犀草素分別對AD體外模型進行干預。實驗分組:
　　1.正常對照組:正常培養(yǎng)的SH-SY5Y細胞;
　　2.AD體外模型組:50μmol/L的Aβ25-35誘導SH-SY5Y細胞;
　　3.治療1組:1μmol/L的木犀草素干預AD體外模型組;
　　4.治療2組:5μmol/L的木犀草素干預AD體外模型組;
　

4、　5.治療3組:10μmol/L的木犀草素干預AD體外模型組;
　　6.治療4組:20μmol/L的木犀草素干預AD體外模型組;
　　實驗采用倒置顯微鏡觀察細胞形態(tài)學變化及透射電鏡觀察細胞超微結(jié)構(gòu)改變;MTT法檢測各組細胞存活率;酶標儀法檢測培養(yǎng)液中乳酸脫氫酶(LDH)的活性;流式細胞儀檢測各組細胞凋亡率;通過測定丙二醛(MDA)含量、總谷胱甘肽(GSH)含量以及測定超氧化物歧化酶(SOD)活力來評估細胞氧化損傷程度。

5、>　　結(jié)果:
　?。ㄒ唬┬螒B(tài)學觀察
　　1.正常對照組:光鏡下細胞數(shù)量多，突觸明顯，細胞呈現(xiàn)多邊形，生長狀態(tài)良好，細胞的折光性正常。電鏡下細胞核圓，細胞核仁大，細胞器清晰可見，細胞器的數(shù)量，正常結(jié)構(gòu)。
　　2.AD體外模型組:光鏡下細胞數(shù)量明顯減少，細胞結(jié)構(gòu)消失，細胞呈多邊形或不規(guī)則形，生長狀態(tài)差，細胞折光性明顯變差。電鏡下細胞核呈現(xiàn)不規(guī)則形狀，核仁呈邊向分布，細胞器數(shù)量明顯減少，整體結(jié)構(gòu)雜亂。
　　3.治療1-

6、3組:光鏡下隨著藥物濃度的遞增，細胞數(shù)量均明顯增多，個體逐步飽滿，折光性明顯改善，生長狀態(tài)逐步好轉(zhuǎn)。電鏡下，細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)狀態(tài)逐步向正常細胞對照組接近，細胞核逐漸變圓，質(zhì)內(nèi)細胞器增多，結(jié)構(gòu)逐步向正常細胞接近。
　　4.治療4組:光鏡下極少見明確細胞結(jié)構(gòu)，細胞破碎，生長狀態(tài)及折光性均極差，細胞損害程度相當嚴重，形態(tài)學改變十分明顯。電鏡下僅存的細胞結(jié)構(gòu)不明顯，核膜皺縮，細胞器少而結(jié)構(gòu)破壞嚴重，較少見完整細胞器，整體結(jié)構(gòu)雜亂難以分辨。

7、r>　?。ǘ┥窠?jīng)保護作用的評估
　　1.與正常對照組相比較，AD體外模型組的MTT吸光度OD值與細胞存活率均明顯下降(P＜0.01)，LDH活性及細胞凋亡率明顯抬高(P＜0.01)。
　　2.與AD體外模型組比較，治療1-3組的MTT吸光度OD值增加(P＜0.05)，細胞存活率明顯提高(P＜0.01)，LDH活性明顯回落(P＜0.01)，細胞凋亡率下降(P＜0.05)。治療3組的MTT吸光度OD值及細胞存活率達最高，LDH

8、活性及細胞凋亡率達最低。
　　3.與AD體外模型組比較，治療4組的吸光度OD值與細胞存活率均降低(P＜0.05)，LDH活性及細胞凋亡率明顯提高(P＜0.01)。
　　（三）氧化損傷程度的評估
　　1.與正常對照組相比較，AD體外模型組的MDA含量顯著升高(P＜0.01)，SOD活力顯著降低(P＜0.01)，GSH含量明顯回落(P＜0.01)。
　　2.與AD體外模型組比較，治療1-3組的MDA含量均降低(P＜0

9、.05)，SOD活力明顯提高(P＜0.01)，總GSH含量明顯提升(P＜0.01)。治療3組的MDA含量達最低，SOD活力及總GSH含量最高。
　　3.與AD體外模型組比較，治療4組的MDA含量顯著抬高(P＜0.01)，SOD活力明顯回落(P＜0.01)，GSH含量顯著下降(P＜0.01)。
　　結(jié)論:
　　1.低劑量的木犀草素對于AD體外模型具有神經(jīng)保護作用。
　　2.這種神經(jīng)保護作用的機制可能源于減少AD體外