O型口蹄疫病毒緬甸98株空衣殼表達(dá)及免疫原性分析.pdf

1、口蹄疫(foot-and-mouth disease，F(xiàn)MD)是由口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus, FMDV)引起的一種急性、烈性、高度接觸性傳染病，主要侵害豬、牛、羊等偶蹄動物，疾病的發(fā)生對畜牧業(yè)造成巨大損害。世界動物衛(wèi)生組織(OIE)將其列為必須通報(bào)的傳染病，我國也將其列在一類傳染病之首。目前，接種疫苗是防控FMD的有效手段，F(xiàn)MD滅活疫苗在FMD的防控過程中發(fā)揮著不可替代的作用。常規(guī)滅活疫苗是

2、毒株經(jīng)病毒培養(yǎng)擴(kuò)增，滅活劑處理后添加佐劑制成的，其生產(chǎn)過程存在滅活不完全和散毒的風(fēng)險(xiǎn)。病毒空衣殼包含了完整病毒上的所有免疫顯性位點(diǎn)，且不含核酸成分，因而具有更高的安全性，是一種能替代滅活病毒制造疫苗的新型免疫原。
　　本研究以近年來流行的O型FMDV緬甸98株（O/MYA98/BY/2010株）為研究對象，構(gòu)建了表達(dá)緬甸98株衣殼蛋白的桿狀病毒，并通過查閱相關(guān)文獻(xiàn)和參照本實(shí)驗(yàn)室FMDV O型ON株酸化培養(yǎng)的結(jié)果，進(jìn)一步構(gòu)建了兩組在

3、FMDV P1序列包含不同耐酸定點(diǎn)突變的衣殼蛋白表達(dá)重組桿狀病毒。三組重組桿狀病毒感染Sf9昆蟲細(xì)胞成功表達(dá)并收集重組衣殼蛋白，通過間接免疫熒光試驗(yàn)、蛋白免疫印跡、雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等多種方法檢測到重組衣殼蛋白的表達(dá)，且具有良好的抗原性。經(jīng)過耐酸定點(diǎn)突變的兩組衣殼蛋白也表現(xiàn)出相應(yīng)的耐酸作用。將重組衣殼蛋白混合GEL佐劑制成疫苗，免疫小鼠后能夠刺激機(jī)體產(chǎn)生與滅活疫苗一致甚至更高的抗體水平，免疫豚鼠攻毒保護(hù)試驗(yàn)則表明，三組重組衣殼蛋白