MAPK抑制劑U0126對高糖環(huán)境中腎小球系膜細胞的保護作用.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的： 探討高糖環(huán)境中腎小球系膜細胞合成細胞外基質(zhì)的變化，以及高糖環(huán)境刺激腎小球系膜細胞可能的信號傳導(dǎo)途徑。進一步研究MAPK抑制劑UO126對高糖環(huán)境中腎小球系膜細胞的保護作用。 方法： 1、將培養(yǎng)的腎小球系膜細胞分為六組：正常糖環(huán)境組、高糖環(huán)境組、高糖+UO126 2.5umol幾組、高糖+UO126 5umol/L組、高糖+UO126 10umol/L組、正常糖+UO126 10umol/L。 2、

2、分別在培養(yǎng)24和48小時后，用RT-PCR和Western blot方法測定細胞內(nèi)纖維連接蛋白(FN)和細胞外基質(zhì)重要相關(guān)因子轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β 1)的mRNA表達的變化，以及p-ERK1/2(磷酸化的ERK1/2)、總ERK1/2蛋白的表達。用p-ERK1/2與總ERK1/2蛋白比值反映ERK通路的激活情況，觀察U0126對幾種不同情況下ERK通路阻斷的狀況。 結(jié)果： 1、腎小球系膜細胞在高糖環(huán)境的刺激下，F(xiàn)

3、N和TGF-β mRNA表達的明顯升高，刺激時間越長升高越明顯： 2、高糖環(huán)境中的腎小球系膜細胞經(jīng)UO126干預(yù)后，F(xiàn)N和TGF-β mRNA表達的明顯下降，表現(xiàn)出明顯的量效關(guān)系； 3、腎小球系膜細胞在高糖環(huán)境的刺激下，總ERK1/2蛋白表達無明顯變化，但p-ERK1/2與總ERK1/2比值較正常對照組明顯增加； 4、高糖環(huán)境中的腎小球系膜細胞經(jīng)U0126干預(yù)后p-ERK1/2與總ERK1/2比值明顯下降，且呈濃

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