TIMP-1抑制高糖引起的大鼠腎小球系膜細(xì)胞凋亡.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:探討TIMP-1是否影響高糖誘導(dǎo)的腎小球系膜細(xì)胞凋亡及其作用機(jī)制.方法:1)大鼠腎小球系膜細(xì)胞分別經(jīng)含5mmol/L、10 mmol/L、20 mmol/L、30 mmol/L、40 mmol/L葡萄糖及含30 mmol/L甘露醇的1640培養(yǎng)基培養(yǎng)24h、48h、72h后用流式AnnexinV/PI雙染法檢測凋亡率.2)用脂質(zhì)體將正、反義人TIMP-1及空載體轉(zhuǎn)染到腎小球系膜細(xì)胞中,建立體外的人TIMP-1高表達(dá)和低表達(dá)系統(tǒng).P

2、CR檢測人TIMP-1的整合;RT-PCR檢測人TIMP-1的表達(dá)及轉(zhuǎn)染人TIMP-1后對(duì)大鼠內(nèi)源性鼠TIMP-1表達(dá)的影響.3)描繪各組細(xì)胞的生長曲線.4)高糖刺激24小時(shí)后丫啶橙染色,熒光顯微鏡下觀察.5)用含30 mmol/L葡萄糖的1640培養(yǎng)液作用系膜細(xì)胞24h.RT-PCR檢測bax和bcl-2的表達(dá);CaspACE<'TM> Assay System,Colorimetic試劑盒檢測Caspse-3的蛋白活性.結(jié)論:1)高

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