攜帶ST13基因的雙調(diào)控溶瘤腺病毒治療結(jié)腸癌的研究.pdf

1、在發(fā)達(dá)國家，結(jié)直腸癌發(fā)病率和致死率均列第二位。世界上每年約有100萬新增病例，大約50萬患者因此失去生命。過去的幾十年，盡管手術(shù)治療，放療和化療得到長足發(fā)展，但對于中晚期癌癥患者仍束手無策。因此研制開發(fā)更為有效的癌癥治療方案顯得非常必要和緊。 溶瘤病毒也稱腫瘤特異性增殖病毒是一類很有應(yīng)用前景的抗腫瘤藥物。它能特異性的在腫瘤細(xì)胞中復(fù)制、增殖，從而殺死腫瘤細(xì)胞，而對正常細(xì)胞毒性很小。例如，ONYX-015是通過缺失腺病毒E1B55-

2、kD基因?qū)崿F(xiàn)特異性殺傷腫瘤細(xì)胞的一種溶瘤病毒。臨床實(shí)驗(yàn)證明其具有很好的安全性，但也有其單獨(dú)使用療效不很理想的缺陷性。為進(jìn)一步提高溶瘤病毒的抗腫瘤效果，我們提出了一種新策略：即在溶瘤病毒中引入殺傷或抑癌基因，聯(lián)合基因治療與病毒治療各自的優(yōu)勢來治療腫瘤，并稱之為腫瘤的靶向基因-病毒治療。 本論文利用雙調(diào)控溶瘤腺病毒載體SG500攜帶結(jié)腸癌特異性抑癌基因ST13構(gòu)建一種全新的雙靶向基因-病毒SG500-ST13。該載體的E1A和E1B

3、基因分別受腫瘤特異性啟動子hTERT和HRE的控制，ST13基因則位于病毒的E1A基因之后。我們首先通過基因克隆的方法將ST13基因插入到腺病毒穿梭載體pSG500中，得到pSG500-ST13(見附錄)，繼而在HEK293細(xì)胞中通過同源重組法得到雙靶向基因-病毒SGS00-ST13。 體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，SG500-ST13對結(jié)腸癌細(xì)胞系(HCT116、SW620和HT29)具有明顯的細(xì)胞毒性效應(yīng)，而對正常細(xì)胞系(WI38)沒有