GPS2對AIB1轉錄活性的影響.pdf

1、乳腺癌擴增基因1(Amplifiedinbreastcancer1，AIB1)是一種類固醇受體輔激活因子，能通過招募p300等輔激活因子，增強核受體的轉錄活性，在動物的生長發(fā)育中起重要作用，并參與多種癌癥的發(fā)生、發(fā)展。G蛋白途徑抑制因子2(G-proteinpathwaysuppressor，GPS2)是一種轉錄輔調節(jié)因子，在不同的生理過程中，通過與其它輔抑制或輔激活因子形成轉錄起始復合物，抑制或激活下游靶基因轉錄，在細胞周期調控、DN

2、A修復和脂質代謝等過程中發(fā)揮重要作用。
　　有研究表明GPS2能夠與p300相互作用，并增強乳頭瘤病毒蛋白E2的轉錄活性。以此為依據(jù)，本課題旨在研究GPS2與AIB1之間的相互作用，鑒定二者相互作用的區(qū)域，并探索GPS2與AIB1結合后增強AIB1轉錄活性，進而促進癌癥發(fā)生發(fā)展。本研究為相關腫瘤的治療提供新的途徑。
　　首先，分別構建pBIND-GPS2和pACT-AIB1全長及缺失體的哺乳動物雙雜交質粒，及Flag標記的G

3、PS2與AIB1缺失體表達質粒，為后續(xù)實驗做準備:其次，使用哺乳動物雙雜交和免疫共沉淀實驗證明GPS2與AIB1存在相互作用，并通過免疫熒光實驗確定二者在細胞內存在共定位，說明二者的相互作用在生理上存在相關性;另外，進一步的研究表明GPS2通過其110-234氨基酸區(qū)域與AIB1的612-1004氨基酸區(qū)域（該區(qū)域主要功能域為核受體相互作用區(qū)域NRID）結合;最后，使用熒光素酶報告基因實驗發(fā)現(xiàn)GPS2通過劑量依賴的方式增強AIB1的轉錄