新型組蛋白去乙?；敢种苿?duì)常染色體顯性多囊腎病的作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的:探討新型組蛋白去乙?；敢种苿?DC027)對(duì)常染色體顯性多囊腎病(ADPKD)的作用和機(jī)制
　　 方法:分別在ADPKD動(dòng)物模型和細(xì)胞模型上觀察DC027的作用效果和機(jī)制。ADPKD動(dòng)物模型為Han:SPRD大鼠，根據(jù)基因型鑒定，將大鼠分為多囊腎型和野生型，然后分別給予安慰劑（生理鹽水和二甲基亞砜DMSO），DC027(1mg/kg/d，3mg/kg/d，10mg/kg/d)，陽性對(duì)照藥物SAHA（10mg/kg/d，5

2、0mg/kg/d），觀察腎功能、腎臟病理，用免疫組化檢測HDAC1/6、E-鈣粘素（E-Cadherin）、β-連環(huán)蛋白(β-Catenin)等指標(biāo)，并檢測大鼠腎組織中HDAC1/2/6、E-Cadherin、β-Catenin、乙?；?Catenin、C-myc等蛋白的表達(dá)情況。細(xì)胞模型使用的是人多囊腎囊腫襯里上皮細(xì)胞株(WT9-12)和人腎小管細(xì)胞株(RCTEC)，給予DC027和SAHA以后，運(yùn)用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期和凋亡情況

3、，以及p21、cyclin D1表達(dá)情況，PCR檢測給藥后HDAC1-8的表達(dá)變化，以及Western Blot檢測HDAC1/2/6、E-Cadherin、β-Catenin、乙酰化β-Catenin、C-myc等蛋白的表達(dá)情況。
　　 結(jié)果:與給予安慰劑的對(duì)照組相比，DC027和SAHA均能改善Han:SPRD大鼠的腎功能，腎臟體積縮小，囊腫減少，而且隨著劑量的增加作用更加顯著。在細(xì)胞方面，給予DC027和SAHA后，均能誘

4、導(dǎo)細(xì)胞凋亡增多，對(duì)細(xì)胞周期產(chǎn)生影響，同時(shí)HDAC1-8的RNA水平均下降，HDAC1/2/6的表達(dá)和活性下降，E-Cadherin表達(dá)增加，β-Catenin量減少，乙?；?Catenin增加，C-Myc減少。
　　 結(jié)論:DC027和SAHA均能改善Han:SPRD大鼠腎功能惡化和腎囊腫情況，同時(shí)通過抑制HDAC1/2，對(duì)WT9-12細(xì)胞有誘導(dǎo)凋亡和阻滯細(xì)胞周期的作用，并通過增加E-Cadherin的表達(dá)、抑制HDAC6的表