雙孢蘑菇2796菌株液體菌種的工藝研究.pdf

1、雙孢蘑菇（Agaricus bisporus Imbach）是栽培規(guī)模最大，世界總產量和單位栽培面積產量最高的食用菌。我國是雙孢蘑菇栽培大國，而栽培技術還很落后。本課題針對常規(guī)的栽培方式－固體菌種栽培具有周期長、效率低的特點，進行了雙孢蘑菇液體菌種的工藝研究。雖然目前研究食用菌液體菌種的單位和個人較多，但關于雙孢蘑菇的卻很少。本課題即是針對此種狀況，進行了如下的研究。本課題的主要研究結果如下： 1、以生物量和胞外粗多糖為指標，通

2、過單因子試驗，對雙孢蘑菇2796菌株發(fā)酵培養(yǎng)基進行優(yōu)化，確定雙孢蘑菇2796菌株最佳搖瓶培養(yǎng)基的碳源為玉米淀粉、氮源為豆餅粉、無機鹽為K<,2>HPO<,4>、MgSO<,4>·7H<,2>O、NaCl和CaCl<,2>。最佳發(fā)酵條件為25℃，起始pH6.5，裝液量100mL／250mL，三角瓶，接種量10％，菌齡7d。 2、采用SAS軟件中的Plackett-Burman設計對影響雙孢蘑菇液體發(fā)酵產生物量的重要因素進行了篩選。

3、從發(fā)酵溫度、培養(yǎng)基起始pH、玉米淀粉、豆餅粉、無機鹽K<,2>HPO<,4>、MgSO<,4>·7H<,2>O、NaCl和CaCl<,2>八個考察因素選出碳源玉米淀粉、氮源豆餅粉和無機鹽MgSO<,4>·7H<,2>O為影響實驗的三個重要因素。通過響應面分析法建立模型Y＝2.47-0.16875X<,1>+0.0825X<,2>+0.10625X<,3>-0.25125X<,1><'2>+0.03X<,1>X<,2>-0.0225X<,

4、1>X<,3>-0.1 0875X<,2><'2>-0.075X<,2>X<,3>-0.21625X<,3><'2>推測出在玉米淀粉濃度為31.70g／L，豆餅粉濃度為11.29g／L，MgSO<,4>-7H<,2>O濃度為3.44g／L時預測的最大響應值為2.52g／100mL，經搖瓶發(fā)酵實驗證實此點的實測值為2.54g／mL，證明模型是有效的，并且存在極大值點。得到優(yōu)化后的發(fā)酵培養(yǎng)基配方為：玉米淀粉31.7g／L；豆餅粉11.29g

5、／L；MgSO<,4>·7H<,2>O 3.44g／L；KH<,2>PO<,4> 2.5g／L；CaCl<,2> 7.5g／L；NaCl 6.3g／L；pH 6.5。采用此優(yōu)化培養(yǎng)基，雙孢蘑菇生物量比起始基礎培養(yǎng)基提高了1.78倍。 3、以搖瓶發(fā)酵實驗為基礎，進行了雙孢蘑菇2796菌株50L發(fā)酵罐上的工藝放大。初步研究了雙孢蘑菇在50L發(fā)酵罐中的發(fā)酵條件，確定當通氣量為1:0.6vvm，攪拌速度240r／min，發(fā)酵溫度25℃，