nNOS-Dexras1通路在異丙酚減輕抑郁大鼠電休克后學(xué)習(xí)記憶損害的作用.pdf

1、目的：通過觀察異丙酚聯(lián)合電休克治療(electroconvulsive therapy，ECT)抑郁大鼠后抑郁行為、學(xué)習(xí)記憶功能及海馬神經(jīng)型一氧化氮合酶（neuronal nitric oxide synthase，nNOS）-Dexras1通路相關(guān)蛋白表達(dá)的變化，探討異丙酚減輕電休克后抑郁大鼠學(xué)習(xí)記憶損害的分子機(jī)制。
　　方法：清潔級(jí)雄性SD大鼠，鼠齡12周，體重200～250g。采用慢性輕度不可預(yù)見性應(yīng)激(chronic un

2、predictable mild stress，CUMS)建立抑郁模型。采用隨機(jī)數(shù)字表法，將選取抑郁模型建立成功的大鼠40只，隨機(jī)分為4組（n=10）:抑郁組（D組）腹腔注射生理鹽水8ml/kg;單純丙泊酚組（DP組）腹腔注射異丙酚80mg/kg;單純ECT組(DE組)腹腔注射生理鹽水8ml/kg后實(shí)施電休克處理（參數(shù)設(shè)置為雙相矩形波、波幅0.8A、波寬1.5ms、頻率1.25Hz、時(shí)程0.8s、電量120mC）;異丙酚+ECT組（DP

3、E組）腹腔注射異丙酚80mg/kg待翻正反射消失后實(shí)施電休克處理。以上處理每天1次，連續(xù)7d。建模前、建模后、處理結(jié)束后采用糖水偏好實(shí)驗(yàn)、Open-field實(shí)驗(yàn)（水平活動(dòng)距離和直立次數(shù)）評(píng)價(jià)大鼠抑郁狀態(tài)。建模后、處理結(jié)束后采用Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)（逃避潛伏期和空間探索時(shí)間）檢測學(xué)習(xí)記憶能力。所有測試完成后處死大鼠，采用免疫組織化學(xué)法檢測大鼠海馬CA1、CA3、DG區(qū)nNOS、CAPON的表達(dá)，免疫熒光標(biāo)記和激光共聚焦技術(shù)檢測大鼠海馬

4、CA1、CA3、DG區(qū)Dexras1表達(dá)，逆轉(zhuǎn)錄聚合酶連反應(yīng)（RT-PCR）法檢測海馬nNOS、CAPON、Dexras1 mRNA的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　(1) Open-field評(píng)分:與建模前比較，建模后大鼠水平活動(dòng)距離和直立次數(shù)減少（P＜0.05）;處理前4組水平活動(dòng)距離和直立次數(shù)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）;處理后，與D組比，DE組和DPE組水平活動(dòng)距離和直立次數(shù)增加（P＜0.05）。
　　(2)糖水偏

5、好:與建模前比較，建模后大鼠糖水偏好百分比降低（P＜0.05）;處理前4組大鼠糖水偏好百分比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）;處理后，與D組比，DE組和DPE組糖水偏好百分比增加(P＜0.05)。
　　(3)學(xué)習(xí)記憶功能:處理前，4組大鼠逃避潛伏期、空間探索時(shí)間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）;處理后，與D組比，DE組逃避潛伏期延長、空間探索時(shí)間縮短（P＜0.05）;與DE組比，DPE組逃避潛伏期縮短、空間探索時(shí)間延長(P＜0.0

6、5)。
　　(4)海馬nNOS和CAPON蛋白表達(dá):與D組比，DP組nNOS、CAPON蛋白和mRNA表達(dá)減少（P＜0.05），DE組nNOS蛋白和mRNA表達(dá)增加(P＜0.05)，CAPON蛋白和mRNA表達(dá)減少(P＜0.05)，nNOS/CAPON比值增加(P＜0.05);與DE組比，DPE組nNOS蛋白和mRNA表達(dá)減少（P＜0.05），CAPON蛋白和mRNA表達(dá)增加（P＜0.05），nNOS/CAPON比值降低(P＜0.

7、05)。
　　(5)相關(guān)分析:海馬CA1、CA3、DG區(qū)nNOS、CAPON、nNOS/CAPON與逃避潛伏期和空間探索時(shí)間有相關(guān)性，nNOS/CAPON比nNOS、CAPON與逃避潛伏期和空間探索時(shí)間更為相關(guān)。
　　(6)海馬Dexras1的表達(dá):與D組比，DP組Dexras1蛋白和mRNA表達(dá)降低(P＜0.05)，DE組Dexras1蛋白和mRNA表達(dá)減少（P＜0.05）;與DE組比，DPE組Dexras1蛋白和mRNA