2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:探討腫瘤壞死因子-α是否能夠促進HepG2肝細胞脂質(zhì)積聚,并對其機制進行初步探討。
  方法:將HepG2肝細胞分為空白對照組、單純TNF-α組(TNF-α2 ng/mL或20 ng/mL)、軟脂酸組(PA0.08 mM或0.2 mM)及聯(lián)合組(TNF-α2 ng/mL聯(lián)合PA0.08 mM、TNF-α2 ng/mL聯(lián)合PA0.2 mM、TNF-α20 ng/ mL聯(lián)合PA0.08 mM或TNF-α20ng/ mL聯(lián)合PA0

2、.2mM),處理24 h,應(yīng)用化學(xué)酶促-比色法定量檢測細胞內(nèi)TG含量。進一步選取TNF-α20 ng/mL和軟脂酸0.08 mM,通過油紅O染色觀察HepG2細胞內(nèi)脂質(zhì)積聚情況;熒光定量PCR檢測HepG2細胞SREBP-1、FAS、ACCα的mRNA表達水平;Western blot檢測mTOR、S6K磷酸化水平以及SREBP-1、FAS、ACCα的蛋白表達水平。
  結(jié)果:①單純TNF-α刺激(2 ng/ml、20 ng/ml

3、)增加HepG2細胞內(nèi)脂質(zhì)積聚(P<0.05); TNF-α與軟脂酸聯(lián)合處理顯著增加胞內(nèi)TG含量(P<0.05);0.2 mM軟脂酸處理也使胞內(nèi)TG含量輕度增加(P<0.05),而0.08 mM軟脂酸對肝細胞內(nèi)的TG水平?jīng)]有影響。②油紅O染色進一步顯示,TNF-α促進肝細胞內(nèi)脂質(zhì)積聚。③定量PCR和Western blot結(jié)果顯示,單純TNF-α組與空白對照組相比,HepG2細胞SREBP-1、FAS、ACCα的mRNA和蛋白表達均增加

4、(P<0.05);聯(lián)合組與軟脂酸組相比,肝細胞內(nèi)SREBP-1、FAS、ACCα的mRNA和蛋白表達水平明顯上調(diào)(P<0.05)。④Western blot顯示,單純TNF-α組與空白對照組相比,HepG2細胞mTOR、S6K磷酸化水平升高(P<0.05);聯(lián)合組與軟脂酸組相比,mTOR、S6K磷酸化水平明顯上調(diào)(P<0.05)。
  結(jié)論:TNF-α促進HepG2肝細胞內(nèi)脂質(zhì)積聚,上調(diào)mTOR、S6K磷酸化水平以及SREBP-1

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