丹參酮ⅡA微乳的研制及其質(zhì)量評價.pdf

1、丹參酮ⅡA具有確切的心腦血管藥理作用和很強的抗白血病、抗腫瘤活性，但其因水溶性差、半衰期短，限制了在臨床上的應用。微乳具有增加藥物溶解度、延長藥物釋放時間、減小注射疼痛等優(yōu)點，是一種應用前景良好的注射用載體。本課題以脂溶性中藥成分丹參酮ⅡA為模型藥物研制注射用微乳，通過對丹參酮ⅡA相關性質(zhì)的考察，并借助偽三元相圖，著重研究了微乳處方和制備工藝，得到了乳化劑用量較小、增溶效果較好、質(zhì)量較穩(wěn)定的空白微乳，并以此為載體，制得丹參酮ⅡA微乳；借

2、助透射電鏡、激光粒度分析儀、Zeta電位儀、高效液相色譜儀等檢測手段，對丹參酮ⅡA微乳進行了質(zhì)量研究。本課題，旨在為水難溶性中藥成分制備成注射用微乳以及微乳走向生產(chǎn)和臨床應用的可行性做出有益嘗試。 通過對丹參酮ⅡA的溶解行為的考察，發(fā)現(xiàn)丹參酮ⅡA屬于脂水兩難溶性物質(zhì)；通過對其對光、熱穩(wěn)定性考察，發(fā)現(xiàn)光和熱對丹參酮ⅡA有一定的影響，需避光貯存；建立了丹參酮ⅡA的體外含量測定方法，為空白微乳的處方篩選和丹參酮ⅡA微乳的質(zhì)量評價提供了

3、依據(jù)。 選用注射用大豆磷脂、聚氧乙烯氫化蓖麻油(Cremophor EL)、吐溫-80、F68等為乳化劑，無水乙醇、異丙醇、1，2-丙二醇、PEG400、甘油等為助乳化劑，油酸乙酯、三油酸甘油酯、辛酸/癸酸甘油酯(GTCC)、注射用大豆油為油相，在滴定法繪制偽三元相圖的基礎上來考察乳化劑、助乳化劑及油相等對微乳區(qū)面積和油相增溶量能力的影響進行乳化劑、助乳化劑和油相篩選。單一乳化劑體系中，聚氧乙烯氫化蓖麻油/乙醇/油酸乙酯/水體系

4、能得到較大面積的微乳區(qū)域，且對油的增溶能力也較好。采用不同親水親油性乳化劑配伍作為復合乳化劑，所得到的相圖微乳區(qū)域面積和對油的增溶能力均較單一乳化劑好，其中以聚氧乙烯蓖麻油/磷脂配伍的效果最好。因此以聚氧乙烯蓖麻油/磷脂為復合乳化劑，對其配比(Rs值)、Km值(復合乳化劑和助乳化劑的質(zhì)量比)對微乳區(qū)域面積和油量增溶能力的影響進行了研究，最終確定了Km值分別為3:1:2和3:1:4。在相圖研究的基礎上，采用Km(3:1:2和3:1:4)值

5、為指導，制備空白微乳，以外觀形態(tài)、粒徑及其分布、載藥量、穩(wěn)定性為指標，進行微乳處方的篩選，最后確定使用表面活性劑用量最低、油量增溶能力最好的空白微乳處方：聚氧乙烯蓖麻油/磷脂/乙醇/油酸乙酯/水(3:1:2:4:10)。單因素試驗考察了微乳的制備工藝(藥物加入順序、分散方式、攪拌時間、攪拌速度和溫度)對微乳載藥量的影響，最終確定了載藥微乳制備條件：先制備空白微乳，再加藥后于25℃、200 r·min<'-1>磁力攪拌下分散6小時，過濾，

6、即得所需載藥微乳。 隨后按照優(yōu)選的微乳處方和制備工藝，進行了丹參酮ⅡA微乳的制備，并對丹參酮ⅡA微乳進行了質(zhì)量研究。所制丹參酮ⅡA微乳為外觀均一透明、淺橙色液體，平均粘度為6.5 mm<'3>·s<'-1>，電導率為65.9μs·cm<'-1>，pH為6.56。采用透射電鏡法考察微乳的形態(tài)，發(fā)現(xiàn)丹參酮ⅡA微乳基本以球形存在，且分布較均勻。用Nano-Zetasize 3000HS型激光粒度分析儀測定丹參酮ⅡA微乳粒徑及其分布情況

7、，所制微乳平均粒徑為22.6 nm?？疾炝说⑼駻微乳的稀釋穩(wěn)定性，所制微乳用雙蒸水和生理鹽水稀釋后未出現(xiàn)混濁，粒徑幾乎無變化。建立了RP-HPLC法測定丹參酮ⅡA微乳中丹參酮ⅡA的含量，在2.164～138.5μg·ml<'-1>范圍內(nèi)丹參酮ⅡA濃度和色譜縫面積線性關系良好，(r=0.9999，n=6)，方法平均回收率為98.75％，RSD為1.45％。用此法測得所制丹參酮ⅡA微乳中丹參酮ⅡA的平均載藥量為748.4μg·ml<'-

8、1>，比丹參酮ⅡA在水中的溶解度(7μg'g<'-1>)高了100多倍。以外觀、粒徑及其分布、含量等為考察指標，對所制微乳的穩(wěn)定性做了初步評價。4℃下避光放置3個月，丹參酮ⅡA微乳各項指標基本穩(wěn)定；室溫下放置3個月，含量有所下降，外觀顏色變淺，其余指標無顯著變化。初步穩(wěn)定性實驗結(jié)果顯示，丹參酮ⅡA微乳基本穩(wěn)定。綜上所述，本研究制得的聚氧乙烯蓖麻油/卵磷脂空白微乳，所用乳化劑、助乳化劑用量低、穩(wěn)定性好，且能顯著提高丹參酮IIA的溶解度(較