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文檔簡介
1、一、大鼠血管平滑肌細(xì)胞的分離培養(yǎng)與鑒定;用0.2﹪膠原酶消化法進(jìn)行大鼠胸主動脈血管平滑肌細(xì)胞(VSMCs)的分離培養(yǎng),并通過倒置相差顯微鏡及透射電鏡(TEM)對培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行鑒定.培養(yǎng)的細(xì)胞外觀呈長梭形,成束平行排列,部分區(qū)域細(xì)胞多層重疊,部分區(qū)域僅為單層,高低起伏,呈現(xiàn)平滑肌細(xì)胞特征性的"峰-谷"狀生長.二、維生素C對大鼠血管平滑肌細(xì)胞增殖的影響;用不同濃度維生素C(VC)孵育VSMCs,分別于24h、48h及72h,用臺酚藍(lán)拒染法進(jìn)
2、行活細(xì)胞計數(shù),繪制VSMCs生長曲線;并且在VC孵育VSMCs 24h后,采用四唑鹽比色試驗(yàn)測定細(xì)胞存活率.三、維生素C對大鼠血管平滑肌細(xì)胞凋亡的影響;用不同劑量的VC孵育VSMCs48h后,分別于倒置相差顯微鏡和熒光顯微鏡(細(xì)胞經(jīng)吖啶橙染色處理)下觀察其變化并用CCD系統(tǒng)拍照;并采用流式細(xì)胞儀技術(shù)(細(xì)胞經(jīng)碘化丙啶染色處理)對細(xì)胞凋亡進(jìn)行定量分析.結(jié)論:維主素C對大鼠血管平滑肌細(xì)胞增殖的影響呈現(xiàn)雙向效應(yīng),在低濃度時能促進(jìn)血管平滑肌細(xì)胞增
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