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文檔簡介
1、目的:探討骨保護素(osteoprotegerin,OPG)對SD大鼠(Sprague Dawleyd)主動脈血管平滑肌細胞(Vascular smooth musle cell,VSMC)凋亡的影響及其相關(guān)機理。
方法:
1.在無血清培養(yǎng)基條件下,不同濃度的OPG(0、5ng/ml、10ng/ml、20ng/ml、50ng/ml、100ng/ml、200ng/ml、400ng/ml)與VSMC共同孵育24小時后,用
2、流式細胞術(shù)(Flow Cytometer,F(xiàn)CM)及原位細胞凋亡法檢測(TdT-mediated dUTP-biotin nick end labeling,TUNEL)細胞凋亡數(shù)。
2.無血清條件下,TRAIL(200ng/ml)和anti-TRAIL(100ng/ml)分別與20ng/ml OPG與VSMC共同孵育24h后,用FCM檢測細胞凋亡率。
結(jié)果:
1.低濃度OPG(0-20ng/ml)可呈濃度
3、依賴性誘導體外培養(yǎng)SD大鼠VSMC凋亡,OPG濃度為20ng/ml時,其誘導效應最明顯。
2.高濃度OPG(50-400ng/ml)可呈濃度依賴性抑制體外培養(yǎng)SD大鼠VSMC凋亡,OPG濃度為200ng/ml時,其抑制效應最明顯。
3.無血清條件下,OPG(20ng/ml)對體外培養(yǎng)SD大鼠VSMC凋亡效應均不受TRAIL(200ng/ml)及anti-TRAIL(100ng/ml)的影響。
結(jié)論:低濃度重
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