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1、植物芽再生能力是遺傳轉(zhuǎn)化的基礎(chǔ)。幼胚是玉米(Zea mays L.)常用的遺傳轉(zhuǎn)化外植體,不同基因型玉米的芽再生能力差別很大。目前關(guān)于調(diào)控玉米芽再生能力的基因鮮有報(bào)道,因此挖掘調(diào)控玉米芽再生能力的重要基因不僅有利于提高玉米遺傳轉(zhuǎn)化頻率而且還有助于加深人們對(duì)芽再生能力遺傳調(diào)控分子基礎(chǔ)的理解。
本研究選取367份來自全球不同地區(qū)的玉米自交系,先后在2013年和2014年夏天種植,取授粉后11d的幼胚進(jìn)行組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)。在培養(yǎng)過程中,
2、對(duì)誘導(dǎo)培養(yǎng)0d、誘導(dǎo)培養(yǎng)15d、誘導(dǎo)培養(yǎng)30d、分化培養(yǎng)0d、分化培養(yǎng)30d5個(gè)時(shí)期的愈傷組織狀態(tài)及愈傷組織芽分化情況進(jìn)行觀察,并對(duì)初級(jí)愈傷組織誘導(dǎo)率、成熟愈傷組織誘導(dǎo)率、愈傷組織狀態(tài)、愈傷組織增殖能力、愈傷組織芽再生率及單個(gè)愈傷組織芽再生數(shù)6個(gè)性狀進(jìn)行量化分析。繼而通過全基因組關(guān)聯(lián)分析方法找到組織培養(yǎng)能力相關(guān)的基因。主要研究結(jié)果如下:
(1)通過對(duì)授粉后11d的幼胚進(jìn)行組織培養(yǎng),得到了367份玉米自交系幼胚的組織培養(yǎng)表型數(shù)據(jù)
3、。結(jié)果表明,不同基因型的玉米自交系之間表型差異很大,如CIMBL3、CML426、CML323等玉米自交系愈傷組織狀態(tài)較好,芽再生頻率分別能達(dá)到75%、65.5%、64.5%,而有些自交系形成的愈傷組織不能分化形成芽。
?。?)結(jié)合RNA測(cè)序獲得的高質(zhì)量的SNP數(shù)據(jù),通過全基因組關(guān)聯(lián)分析,共得到了132個(gè)標(biāo)記-性狀關(guān)聯(lián),并通過功能注釋得到了58個(gè)候選基因,這些候選基因分別與6個(gè)性狀相關(guān)。
?。?)對(duì)玉米芽再生過程6個(gè)性狀
4、間的相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn),初級(jí)愈傷組織誘導(dǎo)率與成熟愈傷組織誘導(dǎo)率存在相關(guān)性,而愈傷組織誘導(dǎo)率與愈傷組織芽再生率之間并不存在相關(guān)性,愈傷組織增殖能力與愈傷組織芽再生率之間也不存在相關(guān)性,愈傷組織誘導(dǎo)、愈傷組織的生長(zhǎng)速度和愈傷組織芽分化過程是相互獨(dú)立的,高愈傷組織誘導(dǎo)率并不一定伴隨高的愈傷組織芽分化率,因此,愈傷組織的誘導(dǎo)和愈傷組織芽分化過程是受不同遺傳因子調(diào)控的。
?。?)選擇4個(gè)玉米愈傷組織芽再生相關(guān)的基因進(jìn)行了初步功能分析。GRMZ
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