苯丙氨酸對胚鼠皮層神經(jīng)元表達譜的影響.pdf

1、苯丙氨酸及其代謝產(chǎn)物在體內(nèi)蓄積,可導致苯丙酮尿癥患者產(chǎn)生智力落后,但其中具體機制還不甚清楚.有一種觀點認為膠質(zhì)細胞功能異常是苯丙酮尿癥的原發(fā)性損害,神經(jīng)元損傷是繼發(fā)性的.為了解苯丙酮尿癥患者高苯丙氨酸對神經(jīng)元的原發(fā)性損傷,該文分為如下三部分.第一部分建立實時熒光PCR方法,為驗證基因芯片的結(jié)果打下基礎(chǔ).同時,檢測高濃度苯丙氨酸對胚鼠大腦皮層神經(jīng)元生長相關(guān)蛋白43(GAP-43)和鳥苷酸結(jié)合蛋白α 1(Go α 1)基因的影響,并以此兩基

2、因作為每批神經(jīng)元培養(yǎng)和誘導成功的標志.第二部分用基因芯片方法研究苯丙氨酸對神經(jīng)元表達譜的影響.將苯丙氨酸組與正常對照組抽提的RNA與大鼠神經(jīng)生物學芯片U34雜交,檢測未成熟神經(jīng)元高濃度苯丙氨酸作用下基因表達譜的改變,并用實時熒光定量聚合酶鏈式反應方法驗證基因芯片的結(jié)果.第三部分研究苯丙氨酸對神經(jīng)元胞漿游離鈣的影響.我們著重觀察了基因芯片中與鈣離子相關(guān)蛋白的表達情況,發(fā)現(xiàn)高濃度苯丙氨酸能增加calmodulin Ⅰ、Ca<'2+>/cal