苯丙氨酸導(dǎo)致皮層神經(jīng)元損傷的Rho GTPases及Caspase 3機(jī)制研究.pdf

1、苯丙酮尿癥是一種導(dǎo)致兒童智力發(fā)育落后的遺傳代謝性疾病，苯丙氨酸及其代謝產(chǎn)物在體內(nèi)蓄積是苯丙酮尿癥患者腦損傷的原因，但其導(dǎo)致腦損傷的確切機(jī)理不甚明了。另外苯丙氨酸致腦損傷是一個(gè)很好的化學(xué)性腦損傷臨床模型，揭示其發(fā)病機(jī)制，不僅有助于苯丙酮尿癥的防治，更能夠?qū)ι窠?jīng)損傷保護(hù)和再生的研究提供啟迪。本課題主要研究調(diào)節(jié)神經(jīng)突起生長的重要信號(hào)蛋白R(shí)ho家族的鳥苷三磷酸酶及凋亡的主要執(zhí)行子Caspase3在苯丙氨酸損傷神經(jīng)發(fā)育中所起的作用，另外觀察腦源性

2、神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)在這過程中的作用?！　≡隗w外培養(yǎng)胎鼠大腦皮層神經(jīng)元模型中，用雙標(biāo)記免疫組化即MAP2標(biāo)記樹突，Tau1標(biāo)記軸突，在2天、4天兩時(shí)間點(diǎn)都發(fā)現(xiàn)，高濃度的苯丙氨酸(0.9mM)減少了神經(jīng)元初級(jí)樹突及分枝的數(shù)量和樹突棘的密度，但如同時(shí)加入BDNF(100ng/ml)則明顯增加樹突及樹突棘的數(shù)量。進(jìn)一步我們?cè)诜肿铀教接懕奖彼岣蓴_神經(jīng)元突起生長的機(jī)制。用Rea1timePCR和Westernblot研究苯丙氨酸對(duì)Rho