2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、隨著甜味劑阿斯巴甜(Aspartame,AMP)的生產與應用的增加,L-苯丙氨酸(L-phenylalanine,L-Phe)作為其關鍵生產原料市場需求量大大增加。但國內生產尚不能滿足市場需求,主要依賴進口。因此利用基因工程手段構建L-Phe的高產菌株意義重大。
  本研究運用以下方法構建多基因載體以改造大腸桿菌 L-Phe生物合成途徑提高其產量:?克隆磷酸烯醇式丙酮酸合成酶基因ppsA、轉酮酶基因tktA及其間隔調控序列(RBS

2、),構建串聯(lián)重組子pZE12-AFPT與pZE12-AGPT;?將質粒pTrc-99a-ppsA、pTrc-99a-tktA分別轉入感受態(tài) MG△pZE21-AF,得到雙抗性載體;?將質粒pZA31-ppsA-tktA轉入感受態(tài)MG△pZE21-AF、MG△pZE12-AF及MG△pZE12AFK中,得到含多個基因的雙抗性重組子。
  通過單因素和正交試驗設計優(yōu)化發(fā)酵培養(yǎng)條件,利用SDS-PAGE觀測各酶蛋白表達量。結果表明重組質

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