利多卡因對LPS誘導的肺泡Ⅱ型上皮細胞炎癥因子表達的影響.pdf

1、目的:探討利多卡因對內毒素誘導的大鼠肺泡Ⅱ型上皮細胞(AT-Ⅱ細胞)炎癥因子表達的影響。
　　 方法:成年雄性SD大鼠，體重180～200g，放血處死后提取AT-Ⅱ細胞，經(jīng)分離、純化、培養(yǎng)和鑒定后，隨機分為4組(n=6):空白對照組（C組）、LPS組、利多卡因+LPS(L+LPS組)、利多卡因組（L組），L+LPS組在給予LPS30min后加入利多卡因，LPS的終濃度為1ug/ml，利多卡因的終濃度為20ug/ml，各組分別在孵

2、育4h，12h，24h結束后用蛋白免疫印跡法(WesternBlot)檢測AT-Ⅱ細胞Toll樣受體4(TLR4)，核轉錄因子-kB(NF-kB)蛋白表達水平，酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測細胞培養(yǎng)上清中腫瘤壞死因子-a(TNF-a)，白細胞介素-6(IL-6)的水平。
　　 結果:1.WesternBlot結果顯示，C組AT-Ⅱ細胞上有TLR4蛋白的表達，但表達量較低;LPS組AT-Ⅱ細胞在4h，12h，24h點TLR4及N

3、F-kB蛋白的表達量明顯高于C組(P＜0.05);與LPS組比較，L+LPS組AT-Ⅱ細胞4h，12h，24h點TLR4及NF-kB蛋白表達明顯下降(P＜0.05)，C組AT-Ⅱ細胞的TLR4及NF-kB蛋白表達量與L組相比，無明顯差異(P＞0.05)。
　　 2.ELISA結果顯示，與C組比較，LPS組AT-Ⅱ細胞4h，12h，24h點TNF-a及IL-6釋放量均明顯升高(P＜0.05)。L+LPS組AT-Ⅱ細胞4h，12h，