妊娠晚期小鼠子宮COX-1介導(dǎo)PGD2的生成.pdf

1、背景與目的：
　　環(huán)氧化酶(COX)催化花生四烯酸(AA)代謝產(chǎn)生前列腺素類物質(zhì)(PGs)。 PGs在哺乳動物體內(nèi)作用極為廣泛，其主要是通過作用于細(xì)胞膜上的相應(yīng)受體對機(jī)體的生理過程發(fā)揮重要調(diào)控作用,其中包括妊娠的多個環(huán)節(jié)。研究業(yè)已證實(shí)，COX-2基因敲除（COX-2-/-）小鼠不能正常妊娠，而COX-1基因敲除（COX-1-/-）小鼠可以正常妊娠卻分娩困難。因此，COX-1可能在妊娠晚期主導(dǎo)PGs的生成，如分娩所必需的PGF2α。

2、此外，PGD2合成酶(PGDS)在妊娠晚期表達(dá)水平上調(diào)，能夠誘發(fā)子宮平滑肌的收縮效應(yīng)。提示COX-1介導(dǎo)的AA代謝可能通過產(chǎn)生PGD2來調(diào)節(jié)子宮平滑肌的收縮。然而，與主要前列腺素PGF2α相比，在小鼠妊娠晚期子宮中PGD2的產(chǎn)生和產(chǎn)量還不清楚；COX-1對PGD2的影響尚不明確。鑒于此，本研究的目的是利用高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（HPLC-MC）法研究妊娠晚期C57BL/6和COX-1-/-小鼠子宮中PGD2的生成、作用及其COX合成途徑

3、，以明確和闡述妊娠晚期PGD2的作用機(jī)制和重要生理意義。
　　材料與方法：
　　1.建立妊娠晚期C57BL/6小鼠和同基因型背景的COX-1-/-小鼠模型。
　　2. HPLC-MC法檢測未孕及妊娠第20天小鼠子宮中產(chǎn)生的前列腺素類物質(zhì)水平。
　　3.蛋白免疫印跡法（Western blot）檢測未孕及妊娠第20天小鼠子宮中COX-1及DP受體蛋白表達(dá)水平。
　　4. Real-time PCR法檢測未孕及

4、妊娠第20天小鼠子宮中PGDS mRNA表達(dá)水平。
　　5.張力檢測系統(tǒng)檢測妊娠第20天小鼠子宮平滑肌收縮反應(yīng)。
　　結(jié)果：
　　1.在妊娠第20天C57BL/6小鼠子宮，PGD2是最主要的前列腺素，其量在子宮組織大致為1.3 ng/mg，是PGF2α產(chǎn)量的5倍。未孕及COX-1-/-妊娠小鼠子宮中未檢測到PGD2的產(chǎn)生。COX-1抑制劑使妊娠小鼠子宮中PGD2產(chǎn)量降低。
　　2.與未孕小鼠相比，COX-1蛋白在

5、妊娠晚期C57BL/6小鼠子宮中表達(dá)水平上調(diào)，DP1受體蛋白表達(dá)水平則顯著降低。然而，當(dāng)去除子宮內(nèi)膜后，此兩種蛋白表達(dá)水平明顯下調(diào)。妊娠晚期小鼠與未孕小鼠相比子宮中DP2受體蛋白表達(dá)未見明顯變化，但妊娠子宮內(nèi)膜去除后，DP2受體蛋白表達(dá)也未見改變。
　　3.妊娠晚期小鼠與未孕小鼠相比子宮中PGDS mRNA表達(dá)水平上調(diào)10倍以上，但去除妊娠子宮內(nèi)膜后，PGDS mRNA表達(dá)水平顯著降低。
　　4. PGD2可以使妊娠晚期小鼠