基底硬度對肝細(xì)胞和肝癌細(xì)胞遷移行為影響的比較研究.pdf

1、目的:通過比較分析不同硬度基底膜上肝細(xì)胞與肝癌細(xì)胞的遷移特征及其骨架構(gòu)象和相關(guān)調(diào)節(jié)分子活性，探索腫瘤細(xì)胞遷移行為變化的成因，加深對腫瘤細(xì)胞遷移本質(zhì)特征的認(rèn)識。
　　方法:運(yùn)用細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察，圖像分析軟件等手段，分別對不同硬度基底上肝癌細(xì)胞，肝細(xì)胞遷移凈距離、遷移速率、均方位移（Mean-squaredDisplacement,MSD）、隨機(jī)運(yùn)動頻率（RandomMotilityCoefficient,D）、轉(zhuǎn)向角和方向持續(xù)性（Di

2、rectionalPersistence,D/T）等參數(shù)進(jìn)行定量分析；通過免疫熒光、酶譜等實(shí)驗(yàn)技術(shù)對不同硬度基底上細(xì)胞骨架變化及MMPs表達(dá)進(jìn)行檢測。
　　結(jié)果:不同硬度基底上HCCLM3和L02細(xì)胞的均方位移趨勢一致，相對于極軟（500Pa）和極硬（glass）基底，HCCLM3和L02細(xì)胞在較軟基底（4000Pa）上具有較高的遷移速率和遷移凈距離，且L02細(xì)胞對運(yùn)動方向的維持能力較HCCLM3細(xì)胞高；加入40μg/mLMMPs

3、抑制劑GM6001后，HCCLM3細(xì)胞的遷移速率、遷移凈距離和對運(yùn)動方向的維持能力一定程度的降低，L02細(xì)胞的遷移速率、遷移凈距離和對運(yùn)動方向的維持能力則顯著降低；三維膠原基質(zhì)中，HCCLM3細(xì)胞穿透基底膜的個數(shù)分別顯著多于L02細(xì)胞穿透基底膜的個數(shù)；加入40μg/mLMMPs抑制劑GM6001后，HCCLM3細(xì)胞穿透基底膜的個數(shù)顯著增加，而L02細(xì)胞穿透基底膜的個數(shù)顯著減少。
　　結(jié)論:二維培養(yǎng)環(huán)境中，基底硬度對細(xì)胞遷移速率存在