干預(yù)Hedgehog信號通路對體外培養(yǎng)人腦膠質(zhì)瘤腫瘤干細胞影響的實驗研究.pdf

1、目的：體外無血清培養(yǎng)原代人腦膠質(zhì)瘤腫瘤干細胞及其特性的鑒定；檢測Hedgehog信號通路在膠質(zhì)瘤腫瘤干細胞中的表達以及Hedgehog信號通路抑制劑環(huán)靶明對體外原代培養(yǎng)的人腦膠質(zhì)瘤腫瘤干細胞生長及增殖影響。
　　方法：將我院神經(jīng)外科手術(shù)切除的膠質(zhì)母細胞瘤標(biāo)本分離、培養(yǎng)出膠質(zhì)瘤腫瘤干細胞。行免疫組化及熒光染色鑒定膠質(zhì)瘤腫瘤干細胞及其腫瘤干細胞特性和Hedgehog信號通路在其的表達。使用CCK-8測定Hedgehog信號通路抑制劑環(huán)

2、靶明對膠質(zhì)瘤干細胞增殖-毒性的影響。
　　結(jié)果：
　　1.使用無血清培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)的懸浮狀的細胞團表達CD133和Nestin標(biāo)記物，其具有無限增值、自我更新能力，10％胎牛血清培養(yǎng)基誘導(dǎo)可分化為膠質(zhì)瘤細胞。
　　2.Hedgehog信號通路關(guān)鍵蛋白Sonic Hedgehog和Smo在膠質(zhì)瘤腫瘤干細胞中表達。
　　3. CCK-8結(jié)果顯示：分別使用Hedgehog信號通路抑制劑0.5,1,5umol/L環(huán)靶明對膠

3、質(zhì)瘤干細胞的生長抑制率依次為（21.93±6.57）%，（32.03±9.13）%，（47.78±16.09）%，（P<0.01）,表明環(huán)靶明可顯著抑制膠質(zhì)瘤腫瘤干細胞的生長增殖，且與濃度呈依賴性；作用時間為4,12,24,36,48,60h環(huán)靶明對干細胞的生長抑制率依次為（25.89±7.11）%，（28.00±10.00）%，（32.98±16.87）%，（35.83±17.44）%，（41.31±16.12）%，（41.58±19