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文檔簡介
1、目的:通過桑椹的免疫作用的研究,初步確定其具有免疫作用的主要部位為桑椹多糖;通過對桑椹多糖的免疫、抗氧化作用的研究及其不同產地、成熟度等組別的含量測定對比,為今后桑椹資源和產品開發(fā),提供一定理論基礎。
研究方法:
1.用MTT法檢測桑椹水提物與醇提物對小鼠脾淋巴細胞增殖活性的影響,檢測桑椹多糖對小鼠脾臟淋巴細胞和腹腔巨噬細胞增殖活性的影響;
2.考察紫外分光光度法測定桑椹多糖含量的最佳條件;
3.
2、用中性紅法檢測桑椹多糖對小鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能的影響;
4.用水楊酸捕捉法測定桑椹多糖對·OH的清除能力;
5.測定不同產地、成熟度、來源的桑椹中桑椹多糖的含量。
結果:
1.桑椹水提物及醇提物對正常小鼠脾淋巴細胞的影響
水提物的濃度為1g(生藥)/ml與0.5g(生藥)/ml時,對正常小鼠脾淋巴細胞有明顯增殖作用(P<0.05),并依劑量呈一定線性關系。醇提物對正常小鼠脾淋巴細胞無明
3、顯增殖作用。結果表明桑椹中具有免疫作用的有效部位存在于桑椹水提物中。
2.桑椹多糖最佳提取方法
取過24目篩的桑椹藥材粉末0.2g,精密稱定,加80%乙醇溶液25ml,超聲提取至無色。小心棄去醇液,將濾渣臵于水浴鍋上揮干至無醇味。殘渣精密加入蒸餾水25ml,稱重,超聲提取30min,放冷補重,過濾,取續(xù)濾液取續(xù)濾液稀釋到合適的倍數(shù),制備成供試品溶液。
3.桑椹多糖的免疫作用
多糖的濃度為1g(生藥
4、)/ml,對正常小鼠脾淋巴細胞有明顯增殖作用(P<0.05),多糖濃度為0.5g(生藥)/ml時,對正常小鼠脾淋巴細胞有非常顯著性差異(P<0.01)。多糖濃度為1g(生藥)/ml,0.5g(生藥)/ml,0.25g(生藥)/ml時,對正常小鼠巨噬細胞有非常顯著性差異(P<0.01)。不同濃度的桑椹多糖處理小鼠巨噬細胞后,其吞噬中性紅的活性與陰性組有差異。其中,多糖濃度為1g(生藥)/ml,0.5g(生藥)/ml時,能顯著增強巨噬細胞的
5、吞噬功能(P<0.01)。
4.桑椹多糖的抗氧化作用
多糖不同濃度對羥自由基的清除作用都隨著濃度的增加而增大,對·OH的清除能力與其濃度具有一定的量效關系;其中多糖濃度2g/L與4g/L對羥自由基的清除作用最明顯。
5.不同組分桑椹的多糖含量比較
桑椹在未成熟前多糖含量較低,成熟后各階段多糖的含量相對穩(wěn)定,趨于穩(wěn)定;廣西區(qū)內不同產地桑椹多糖含量以武鳴區(qū)的最高,欽州市的最低。藥店所售桑椹藥材多糖的含
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