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1、目的:(1)建立神經(jīng)元缺氧缺糖(OGD)模型.(2)在大鼠大腦皮層神經(jīng)元和海馬腦片OGD和NMDA損傷模型上,觀察米諾環(huán)素的保護(hù)作用,并分析其作用環(huán)節(jié)(著重探討與NMDA受體的關(guān)系).(3)探討米諾環(huán)素的保護(hù)作用時間依賴特點.結(jié)論:(1)該實驗建立了在96孔板基礎(chǔ)上的原代皮層神經(jīng)元OGD損傷模型.OGD對神經(jīng)元的損傷作用有明顯的時間依賴關(guān)系,隨著OGD時間增加和再灌時間的延長,其損傷作用增強(qiáng).陽性藥神經(jīng)生長因子和依達(dá)拉奉對OGD損傷有顯
2、著的保護(hù)作用,證明該實驗建立的OGD損傷模型是有效的.該模型為今后高效率篩選抗腦缺血藥物提供了簡便的方法.(2)以O(shè)GD和NMDA誘導(dǎo)大鼠原代神經(jīng)元24 h后的損傷以及海馬腦片即刻損傷.米諾環(huán)素對相對緩慢發(fā)生的神經(jīng)元損傷有濃度依賴性保護(hù)作用,對海馬腦片的即刻損傷作用不明顯;說明米諾環(huán)素的作用不是通過拮抗NMDA受體,而是影響一些損傷的中間環(huán)節(jié).(3)米諾環(huán)素在OGD 3 h后再灌2 h加入米諾環(huán)素(10 μmol/L)仍有神經(jīng)元保護(hù)作用
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