七氟醚復合淺低溫對大鼠海馬腦片缺氧無糖損傷的保護作用.pdf

1、本研究分為二部分： 第一部分 七氟醚復合淺低溫對大鼠海馬腦片缺氧無糖損傷的保護作用 目的: 利用離體海馬腦片缺氧無糖(oxygen-glucose deprivation，OGD)損傷模型探討七氟醚(sevoflurane，sev)復合淺低溫處理對神經(jīng)細胞的保護作用。 方法: 大鼠乙醚麻醉后迅速斷頭取腦，低溫分離海馬并沿矢狀面將其切成0.4mm厚的腦片，放入人工腦脊液(ACSF)中孵育備用，孵育好的海馬腦片被隨

2、機分為6組(n=8)：OGD Ⅰ組，2％sevⅠ組，4％sevⅠ組，OGDⅡ組，2％sevⅡ組，4％sevⅡ組(Ⅰ37℃，Ⅱ 32℃)。2％，4％七氟醚復合不同溫度在缺氧前14min持續(xù)至缺氧期14min對海馬腦片進行處理，觀察各組OGD損傷期間和復氧1h后順向群鋒電位(orthodromicpopulation spike，OPS)的變化，并且測定復氧1h后孵育液乳酸脫氫酶(Lactatedehydrogenase，LDH)釋放率。

3、 結(jié)果: ①在Ⅰ組中，與OGD Ⅰ組相比，2％sev Ⅰ組和4％sev Ⅰ組OPS消失時間有延長趨勢，OPS恢復程度和恢復率有提高趨勢，LDH釋放率有降低趨勢；②七氟醚復合淺低溫后，與OGD Ⅱ組相比，2％sev Ⅱ組和4％sev Ⅱ組OPS消失時間顯著延長(P<0.01)：4％sev Ⅱ組OPS恢復程度和恢復率均提高(P<0.05)，LDH釋放率顯著降低(P<0.01) ③ 2％sev Ⅱ組與2％sev Ⅰ組相比，OPS消失時間

4、延長(P<0.01)，OPS恢復程度和OPSt恢復率有增加趨勢，LDH釋放率顯著降低(P<0.01)；4％sev Ⅱ與4％sev Ⅰ組相比，OPS消失時間(P<0.01)、OPS恢復程度(P<0.05)、OPS恢復率(P<0.05)以及LDH釋放率(P<0.01)均有差異。 結(jié)論: 4％七氟醚復合淺低溫處理大鼠海馬腦片后腦保護效應得到強化。 第二部分 七氟醚復合淺低溫對大鼠海馬腦片缺氧無糖損傷細胞外液氨基酸水平的影響

5、 目的: 在離體海馬腦片缺氧無糖損傷模型基礎上用高效液相技術研究七氟醚復合淺低溫對海馬腦片OGD損傷細胞外液氨基酸水平的影響 方法: 孵育好的海馬腦片被隨機分為6組(n=8)，即OGDⅠ組，2％sev Ⅰ組，4％sev Ⅰ組，OGD Ⅱ組，2％sev Ⅱ組，4％sev Ⅱ組(Ⅰ 37℃，Ⅱ 32℃)。2％，4％七氟醚復合不同溫度處理下使海馬腦片經(jīng)歷OGD損傷，采用反相高效液相(high-performance liquid

6、 chromatography，HPLC)熒光檢測法檢測OGD損傷開始之前、OGD結(jié)束即時、復氧復糖30min和60min時五種氨基酸即天門冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、?；撬?Tau)、甘氨酸(Gly)和γ-氨基丁酸(GABA)的濃度。 結(jié)果: 在OGD損傷開始之前各組五種氨基酸濃度無明顯差異，OGD損傷結(jié)束之后五種氨基酸濃度均顯著增加(P<0.01)，在Ⅰ組內(nèi)，與OGD Ⅰ組各個時間點相比，2％sevⅠ組和4％sev

7、Ⅰ組OGD結(jié)束后各個時間點Glu、Asp和Gly含量均有降低趨勢，而Tau和GABA有增加趨勢更明顯；在Ⅱ組內(nèi)，與OGD Ⅱ組各個時間點相比，2％sev Ⅱ組各個時間點Glu、Asp和Gly含量有降低趨勢，Tau和GABA含量則有增加趨勢，4％sevⅡ組G1u和Asp各個時間點含量降低(P<0.05)，OGD結(jié)束即時Tau和OGD結(jié)束后各個時間點GABA含量增加(P<0.05)，Gly含量各個時間點有下降趨勢；而OGD Ⅱ組OGD結(jié)束后

8、各個時間點Glu和Asp較OGD Ⅰ組含量降低(P<0.05)，Tau和GABA含量增加(P<0.05)，Gly含量有下降趨勢。甚至2％sev Ⅱ組與4％sev Ⅰ組比較，Glu、Asp和Gly含量有降低趨勢而Tau和GABA含量則有升高趨勢。在同一組內(nèi)比較，Glu、Asp和Gly含量隨著復氧時間延長而有降低趨勢，而Tau和GABA含量則隨著時間延續(xù)而有升高趨勢。 結(jié)論: 4％七氟醚復合淺低溫后抗海馬腦片OGD損傷作用得到加強，