短暫缺血缺氧后神經(jīng)頓抑現(xiàn)象中離子通道的研究.pdf

1、在已建立的神經(jīng)頓抑模型上研究各種離子通道的改變，為研究短暫缺氧血清剝奪/復氧復注血清后尋找神經(jīng)細胞頓抑現(xiàn)象存在的確切證據(jù)并探討其演變規(guī)律、探索短暫性腦缺血再灌流后產(chǎn)生的神經(jīng)細胞頓抑現(xiàn)象的本質與特點、揭示神經(jīng)細胞頓抑現(xiàn)象在短暫性局灶性腦缺血后細胞損傷和自身調(diào)節(jié)保護機制中可能的生物學作用與意義。將細胞分為對照組和缺血組，應用電生理膜片鉗技術記錄缺氧復氧后海馬神經(jīng)元的各種鉀通道的電流活動。經(jīng)p-CLAMP軟件進行采樣儲存數(shù)據(jù)，用sigmapl

2、ot8.0軟件進行數(shù)據(jù)的處理和圖像分析。缺血缺氧再灌流后KATP電流增加，在復氧2小時后電流達到最大值，然后逐漸下降，其他的鉀電流有所下降，當KATP電流逐漸恢復的時候，其他的電流有所增大。用KATP阻斷劑格列苯脲后，其他的鉀電流增大。胞內(nèi)透析PKC阻制劑H-7，KATP通道可以被阻斷。在短暫缺氧血清剝奪復氧復注血清后，存在各種K+離子通道活動頻繁改變，其中以KATP為重點研究對象，隨著復氧時間的延長，可以部分恢復。因此對于缺血再灌流后

3、存在神經(jīng)頓抑現(xiàn)象提供有力的佐證。 骨髓基質細胞(MSCs)又叫骨髓間充質干細胞1。是成年哺乳動物骨髓中存在的特殊的非造血組織干細胞，具有多種分化潛能2。我室褚倩3等人對骨髓間充質干細胞誘導分化后的神經(jīng)樣細胞利用免疫組化和westemblot進行了鑒定，發(fā)現(xiàn)在利用二甲基亞砜(DSMO)和丁羥茴醚(BHA)誘導分化后，大部分MSCs變成雙極，多極和雛形，并相互交織成網(wǎng)狀結構，巢蛋白(Nestin)在誘導分化前不表達，在誘導分化后6h

4、達到最高,24小時和48小時逐漸降低。神經(jīng)元特異核蛋白(NeuN)在誘導分化前不表達，在誘導分化后6小時出現(xiàn)表達,24小時和48小時表達增強。因此得出結論,MSCs經(jīng)體外誘導先分化為神經(jīng)干細胞，然后分化為神經(jīng)樣細胞。但是對于該神經(jīng)樣細胞是否具有電生理特性未作研究，國內(nèi)也未見相關類型的報道.本文在以往人員的講究基礎上，利用電生理膜片箝技術對分化的神經(jīng)樣細胞進行了離子通道的研究，觀察其是否具有電生理特性。 本文利用電生理膜片箝技術共檢