氟伐他汀鈉的體內(nèi)外代謝及藥物相互作用研究.pdf

1、氟伐他汀(fluvastatin)是第一個全化學(xué)合成的HMG—CoA還原酶抑制劑。本品結(jié)構(gòu)中氟苯吲哚部分仿擬輔酶,能與HMG—CoA還原酶相互作用,競爭性抑制膽固醇的生物合成,增加低密度脂蛋白膽固醇(LDL—C)受體數(shù)量,恢復(fù)細(xì)胞內(nèi)膽固醇代謝穩(wěn)態(tài),并加速從血漿中清除LDL—C,以達(dá)到降低血脂目的。氟伐他汀對原發(fā)性高膽固醇血癥具顯著療效,明顯降低冠心病發(fā)病率和死亡率,廣泛在病人中使用。高血脂患者通常為中老年人,他們在服用氟伐他汀的同時很有

2、可能服用其它藥物,多藥合用易導(dǎo)致藥物相互作用,引發(fā)不良反應(yīng)。因此了解氟伐他汀的體內(nèi)外代謝情況及預(yù)測藥物可能存在的相互作用,對臨床用藥的安全性具有重要意義。
　　本文試圖通過氟伐他汀鈉的體內(nèi)外代謝和藥物體外相互作用研究來探討不同種屬代謝差異、體內(nèi)外代謝相關(guān)性以及氟伐他汀鈉與其他中西藥物合用時的安全性與合理性。
　　1.氟伐他汀鈉在大鼠、Beagle犬中的藥動學(xué)研究
　　目的:建立血漿中氟伐他汀鈉的含量測定方法,并用此法研

3、究氟伐他汀鈉在大鼠、Beagle犬體內(nèi)的藥代動力學(xué)。
　　方法:取健康SD大鼠和Beagle犬各6只,先口服氟伐他汀鈉,給藥后于不同時間點(diǎn)采血,一周后,靜脈給藥,同法采血。取一定量血漿樣品,加同體積KH2PO4緩沖液(pH2),混勻,用乙醚提取,分取乙醚層,揮干,殘渣加流動相溶解,RP—HPLC進(jìn)樣分析,測定氟伐他汀鈉含量。所得數(shù)據(jù)用3P87藥動學(xué)程序處理,求出有關(guān)的藥動學(xué)參數(shù)。
　　結(jié)果:氟伐他汀在20.16～5040.0

4、 ng·mL-1范圍呈良好的線性關(guān)系。定量限為20.2 ng·mL-1(S/N=10,回收率117.6±1.9％,RSD1.6%,n=5),檢測限為5.04 ng·mL-1(S/N=3)。高、中、低三個質(zhì)控樣品的平均方法回收率為93.3%~110.6%,提取回收率大于90%，日內(nèi)、日間精密度的RSD均小于5%。氟伐他汀鈉在大鼠、Beagle犬中口服或靜注給藥，血藥濃度曲線均符合二室模型，測得的絕對生物利用度分別為45.29+22.48%

5、，65.13+25.20%。
　　結(jié)論：氟伐他汀鈉的生物利用度存在著種屬差異。
　　2．氟伐他汀鈉在大鼠、Beagle犬和人肝微粒體中體外代謝的研究
　　目的：研究氟伐他汀鈉在不同來源的肝微粒體中的代謝，比較大鼠、Beagle犬、人肝微粒體中氟伐他汀鈉代謝的種屬差異。
　　方法：將氟伐他汀鈉與不同種屬（大鼠、Beagle犬、人）、不同誘導(dǎo)處理的鼠肝(β-萘黃酮(BNF)、苯巴比妥(PB)、地塞米松(Dex))微粒

6、體進(jìn)行體外共孵育，孵育一定時間后用冰冷的甲醇終止反應(yīng)，并沉淀蛋白，取上清液進(jìn)行HPLC分析，測定孵育液中剩余氟伐他汀鈉及其代謝產(chǎn)物的量。
　　結(jié)果：氟伐他汀在10.0～2500.0 ng.mL-1范圍呈良好的線性關(guān)系。定量限為10.0 ng.mL-1(S/N=10，回收率為110.0+2.5%，RSD2.3%，n-5)，檢測限為3.0 ng.mL-1(S/N=3)。高、中、低三個質(zhì)控樣品的平均方法回收率為99,3%～105.9%，

7、提取回收率大于95%，日內(nèi)、日間精密度的RSD均小于5%。氟伐他汀鈉在大鼠、Beagle犬、人肝微粒體中分別孵育60min后，其代謝率分別為21%，14%，32%。測得氟伐他汀鈉在大鼠和人肝微粒體中Km，Vmax，Clint值分別為3.79+1.00μmol·L-1、97.5±20.1 nmol·L-1·min-1·mg protein-1、0.026+0.003μl·min-1·mg protein-1和1.47±0.10μmol·L

8、-1、106.4±13.6 nmol·L-1·min-1·mgprotein-1、0.073±0.008μl·min-1·mg protein-1。氟伐他汀鈉在不同誘導(dǎo)處理的(BNF、PB、Dex和對照)鼠肝微粒體中的孵育時間曲線表明相互間沒有顯著差異(p>0.05)。經(jīng)LC-MS鑒定，氟伐他汀鈉的主要代謝產(chǎn)物為5-羥化、6-羥化和N-去異丙基氟伐他汀。
　　結(jié)論：氟伐他汀鈉在不同種屬（大鼠、狗、人）肝微粒體中體外代謝速率存在著明

9、顯的種屬差異，其中人肝微粒體中代謝最快，其次是鼠肝，狗肝中最慢，這個結(jié)果與第一部分和文獻(xiàn)的體內(nèi)生物利用度結(jié)果吻合。
　　3．氟伐他汀鈉與一些常用藥物或化合物的相互作用研究
　　目的：研究氟伐他汀鈉與～些常用中西藥物的代謝性相互作用和其對CYP酶的抑制作用，為臨床合理用藥提供科學(xué)依據(jù)。
　　方法：選擇一些可能在臨床上合用的藥物與氟伐他汀鈉共孵育。選擇的西藥類有：非那西丁等5種解熱鎮(zhèn)痛藥，非洛地平等15種心血管類藥，氧氟沙

10、星等8種抗菌藥，氟伏沙明等4種抗抑郁藥，以及其它26種藥物或化合物；中藥類有：槲皮素等14種黃酮類化合物，鹽酸麻黃堿等11種生物堿類，鄰香豆酸等3種苯丙素類，人參皂苷Rgl等10種萜類，觀察這些藥物或藥效成分對氟伐他汀鈉代謝的影響，測定IC50或Ki值。另選擇CYP酶專屬底物和抑制劑與氟伐他汀鈉共孵育，觀察氟伐他汀鈉與這些物質(zhì)之間的相互作用。
　　結(jié)果：黃酮類成分對氟伐他汀鈉代謝有較強(qiáng)的抑制作用，測得Ki值在0.15～85.18μ

11、mol·L-1范圍之間。其中異黃酮類（大豆苷元、黃豆苷元）對氟伐他汀鈉的抑制最強(qiáng)，Ki約0.15μmol·L-1，糖苷化的黃酮比其對應(yīng)的苷元對氟伐他汀鈉代謝的抑制作用顯著減弱。心血管類藥物中非洛地平和尼莫地平對氟伐他汀鈉的代謝有一定的抑制作用，測得IC50為5～9 μmol·L-1?？挂钟羲幹蟹趁骱望}酸氟西汀對氟伐他汀鈉代謝也有一定的抑制作用，測得IC50分別為26～43μmol·L-1和65～78μmol·L-1。CYP2C9的底

12、物或抑制劑，雙氯芬酸鉀、氟比洛芬、磺胺苯吡唑，對氟伐他汀鈉三個代謝產(chǎn)物的生成均有抑制作用，其中CYP2C9專屬抑制劑磺胺苯吡唑?qū)?-羥化-氟伐他汀和N-去異丙基-氟伐他汀鈉有很強(qiáng)的抑制作用，Ki值分別為0.20±0.08μmol·L-1，0.44+0.04μmol·L-1;反之，氟伐他汀鈉也能抑制CYP2C9底物雙氯芬酸鉀和氟比洛芬的代謝，測得Ki值為0.32～0.48μmol·L-1。CYP3A專屬抑制劑酮康唑、環(huán)孢菌素A只對5-羥化

13、-氟伐他汀鈉的生成有抑制作用，IC50分別為27.63μmol·L-1，44.20μmol·L-1。而其它CYPIA2、CYP2C19、CYP2D6、CYP2E1的專屬底物或抑制劑不影響氟伐他汀鈉的代謝，氟伐他汀鈉對這些酶的專屬底物(包括CYP3A4)也沒有抑制作用。
　　結(jié)論：黃酮類化合物和CYP2C9的底物或抑制劑對氟伐他汀鈉代謝有較強(qiáng)的抑制作用，在聯(lián)合給藥時應(yīng)加以注意。其中黃酮類化合物對氟伐他汀鈉代謝的抑制作用值得進(jìn)一步研究