氟苯尼考在家兔體內(nèi)的代謝機(jī)制及藥物間相互作用的研究.pdf

1、氟苯尼考是一種新型的動(dòng)物專用廣譜抗菌藥，它在治療家畜、家禽以及魚類的細(xì)菌感染等方面具有良好的療效。雖然氟苯尼考已被廣泛用于治療和預(yù)防畜禽及水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的疾病，但是對(duì)氟苯尼考在家兔體內(nèi)代謝機(jī)制的研究還非常有限。了解氟苯尼考在動(dòng)物體內(nèi)的代謝模式和調(diào)控機(jī)制，對(duì)有效地控制食品動(dòng)物食用組織的藥物殘留以及避免臨床聯(lián)合用藥時(shí)的藥物間相互作用具有非常重要的臨床意義。 本文對(duì)氟苯尼考在家兔體內(nèi)的代謝機(jī)制和藥物間相互作用的研究主要從以下5個(gè)方面進(jìn)行探討:

2、r>　　 1.氟苯尼考在家兔體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)特征和口服生物利用度的研究氟苯尼考對(duì)治療家兔的胃腸道和呼吸道感染具有良好的療效，同時(shí)它也是治療家兔巴氏桿菌病的首選藥物。但是關(guān)于家兔靜脈注射氟苯尼考的藥代動(dòng)力學(xué)特征及口服生物利用度的研究資料在國(guó)內(nèi)還未見報(bào)道。本試驗(yàn)采用10只健康的雄性新西蘭白兔，分為口服給藥組和靜脈注射給藥組。口服給藥組動(dòng)物按25 mg/kg體重灌服氟苯尼考，靜脈注射給藥組動(dòng)物按25 mg/kg體重耳緣靜脈注射氟苯尼考.兩組

3、動(dòng)物在給藥后12 h內(nèi)收集右側(cè)耳緣靜脈血液，用高效液相色譜測(cè)定家兔口服和靜脈注射氟苯尼考的血藥濃度變化，用3P97藥代動(dòng)力學(xué)軟件處理藥時(shí)數(shù)據(jù)。研究結(jié)果表明:家兔口服和靜脈注射氟苯尼考的藥代動(dòng)力學(xué)特征符合一室開放模型。靜脈注射氟苯尼考藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù):零時(shí)血藥濃度(Co)、消除速率常數(shù)(Ke）、中心室分布容積(Vc)、消除半衰期（T1/2Ke）、藥-時(shí)曲線下面積(AUC)、表觀清除率(CL/F)的結(jié)果分別是22.58±5.53μg/m、0.

4、55±0.07 h-1、1.31±0.21 L/kg、1.33±0.16h、40.06±6.07μg·mL-1·h、0.68±0.10 L/kg/h。家兔口服氟苯尼考后，血漿中藥物的消除相與Y軸的截距(A)、Ke、吸收速率常數(shù)(Ka）、滯留時(shí)間(Lag time)、吸收半衰期(T1/2Ka)、T1/2Ke、達(dá)峰時(shí)間(Tmax)、達(dá)峰濃度(Cmax)、AUC、CL/F和表觀分布容積(V/F)分別為10.21±4.13μg/mL，0.37±

5、0.08 h-1，1.17±0.23 h-1，0.09±0.04 h，0.71±0.16 h，2.20±0.42 h，1.62±0.24 h，2.45±0.46μg/mL，12.26±2.21μg·mL-1·h，2.25±0.30 L/kg/h，7.41±2.06 L/kg。家兔口服氟苯尼考的生物利用度(F)為(46.83±4.92)％。此結(jié)果提示，氟苯尼考的口服生物利用度較低，靜脈注射途徑能達(dá)到較好的治療效果。
　　 2.比較

6、研究CYP450酶對(duì)氟苯尼考在家兔和大鼠上代謝特征的差異15只雄性大鼠，分為氟苯尼考單劑量組、氟伏沙明處理組和酮康唑處理組。氟苯尼考單劑量組動(dòng)物按100 mg/kg體重灌服氟苯尼考;氟伏沙明處理組按60 mg/kg體重連續(xù)3天灌胃氟伏沙明，一天一次，連續(xù)三天，在第三天最后一次給藥后30 min，動(dòng)物按100mg/kg體重灌服氟苯尼考;酮康唑處理組的動(dòng)物與氟伏沙明處理組相同，只是按75mg/kg體重連續(xù)3天灌服酮康唑。15只健康的雄性新西

7、蘭白兔分為氟苯尼考單劑量組、氟伏沙明處理組和酮康唑處理組。氟苯尼考單劑量組動(dòng)物灌服25 mg/kg體重氟苯尼考;氟伏沙明處理組動(dòng)物每天按25 mg/kg體重灌服氟伏沙明，一天一次，連續(xù)3天，在最后一次灌胃氟伏沙明后30 min，按25 mg/kg體重給家兔灌胃氟苯尼考;酮康唑處理組動(dòng)物與氟伏沙明處理組相同，按60 mg/kg體重連續(xù)3天灌服酮康唑。每組動(dòng)物在氟苯尼考灌服后12h內(nèi)收集靜脈血液，用高效液相色譜測(cè)定氟苯尼考的血藥濃度變化，3

8、P97藥代動(dòng)力學(xué)軟件處理藥時(shí)數(shù)據(jù)。結(jié)果表明:大鼠單劑量口服氟苯尼考的藥代動(dòng)力學(xué)分布特征符合一室開放動(dòng)力學(xué)模型。大鼠的CYP1A活性被氟伏沙明特異性抑制后，血漿中氟苯尼考的Cmax、AUC顯著升高(P＜0.05），CL/F和V/F顯著降低(P＜0.05）。大鼠體內(nèi)的CYP3A活性被酮康唑特異性抑制后，氟苯尼考各個(gè)藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)沒有發(fā)生顯著的變化(P＞0.05)。家兔的研究結(jié)果表明:當(dāng)體內(nèi)的CYP3A活性被酮康唑特異性抑制后，血漿中氟苯尼考

9、的AUC值高達(dá)對(duì)照組的3倍(P＜0.05)，CL/F顯著降低到原來(lái)的1/3(P＜0.01)。但是，當(dāng)體內(nèi)的CYP1A活性被氟伏沙明特異性抑制后，血漿中氟苯尼考的各個(gè)藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)均未發(fā)生顯著變化(P＞0.05）。這些結(jié)果表明氟苯尼考在不同的動(dòng)物中是經(jīng)過(guò)不同的CYP450亞型代謝的。CYP1A在大鼠的氟苯尼考代謝中發(fā)揮了重要作用，而CYP3A在家兔的氟苯尼考代謝中起主要代謝作用。
　　 3.P-糖蛋白在家兔氟苯尼考口服代謝中的作用

10、用P-糖蛋白的特異性抑制劑維拉帕米研究了P-糖蛋白在家兔氟苯尼考口服代謝中的作用。10只健康的雄性新西蘭白兔分為氟苯尼考對(duì)照組和維拉帕米處理組。氟苯尼考對(duì)照組按25 mg/kg體重口服單劑量氟苯尼考。維拉帕米處理組在按9 mg/kg體重口服維拉帕米后30 min，按25 mg/kg體重灌服單劑量的氟苯尼考。用高效液相色譜檢測(cè)血漿中氟苯尼考的濃度，3P97藥代動(dòng)力學(xué)軟件處理藥時(shí)數(shù)據(jù)。結(jié)果表明:氟苯尼考單劑量組動(dòng)物血漿中氟苯尼考的Ke和T1

11、/2Ke分別為0.37±0.08h-1和2.20±0.42 h。維拉帕米特異性抑制了體內(nèi)的P-糖蛋白后，氟苯尼考的Ke(0.13±0.04 h-1)顯著降低(P＜0.05)，T1/2Ke(8.85±2.68 h)顯著升高（P＜0.05），AUC(35.78±5.55μg·mL-1·h)比氟苯尼考單劑量組顯著增高了3倍，CL/F(0.75±0.09 L/kg/h)是氟苯尼考單劑量組的1/3。這些結(jié)果表明:P-糖蛋白在家兔氟苯尼考的口服代謝

12、中發(fā)揮了重要作用，抑制P-糖蛋白會(huì)導(dǎo)致體內(nèi)氟苯尼考的生物利用度升高。因此當(dāng)氟苯尼考與P-糖蛋白的底物、抑制劑或者誘導(dǎo)劑聯(lián)合用藥時(shí)，可能會(huì)發(fā)生藥物的相互作用。
　　 4.恩諾沙星對(duì)家兔氟苯尼考代謝的藥代動(dòng)力學(xué)特征的影響。10只新西蘭白兔分為氟苯尼考對(duì)照組和恩諾沙星處理組。氟苯尼考對(duì)照組動(dòng)物按25 mg/kg體重靜脈注射單劑量的氟苯尼考;恩諾沙星處理組動(dòng)物按10 mg/kg體重連續(xù)靜脈注射恩諾沙星3天，在最后一次恩諾沙星給藥后15

13、min，動(dòng)物按25 mg/kg體重靜脈注射氟苯尼考。在氟苯尼考給藥后12h內(nèi)收集耳緣靜脈的血液，用高效液相色譜分析氟苯尼考的藥代動(dòng)力學(xué)變化，3P97藥代動(dòng)力學(xué)軟件處理藥時(shí)數(shù)據(jù)。結(jié)果表明:恩諾沙星連續(xù)處理家兔后，氟苯尼考的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)，如AUC、消除半衰期（T1/2β）和內(nèi)在清除率(CL)等均沒有發(fā)生顯著的變化。這提示臨床上家兔按常規(guī)劑量連續(xù)使用恩諾沙星不會(huì)對(duì)氟苯尼考的代謝產(chǎn)生藥代學(xué)影響，恩諾沙星對(duì)藥物代謝酶的抑制作用可以忽略。

14、　　 5.氟苯尼考和恩諾沙星對(duì)家兔肝臟、腎臟和十二指腸的CYP3A6 mRNA和CYP3A蛋白表達(dá)的影響。12只雄性新西蘭白兔分為空白對(duì)照組、氟苯尼考處理組和恩諾沙星處理組?？瞻讓?duì)照組動(dòng)物不給予任何藥物;氟苯尼考處理組動(dòng)物按25mg/kg體重灌胃氟苯尼考連續(xù)3天。恩諾沙星處理組動(dòng)物按10 mg/kg體重連續(xù)灌服恩諾沙星3天，第4天在無(wú)菌條件下開胸取出動(dòng)物的肝臟、腎臟以及十二指腸。提取三種組織的RNA和微粒體蛋白進(jìn)行RT-PCR和Wea

15、tern blot試驗(yàn)。RT-PCR的結(jié)果表明，氟苯尼考對(duì)家兔CYP3A6的mRNA表達(dá)的影響具有組織特異性。連續(xù)灌服氟苯尼考能顯著的誘導(dǎo)家兔肝臟CYP3A6 mRNA的表達(dá)(P＜0.05)，抑制腎臟CYP3A6mRNA的表達(dá)(P＜0.05)，對(duì)十二指腸的CYP3A6的表達(dá)則沒有顯著影響(P＞0.05)。恩諾沙星能顯著的抑制家兔肝臟CYP3A6 mRNA的表達(dá)(P＜0.05），對(duì)十二指腸和腎臟的CYP3A6表達(dá)沒有顯著的抑制作用(P＞0