雌激素對香豬睪丸支持細(xì)胞、生殖細(xì)胞、ERs等的影響研究.pdf

1、雌激素是動物體內(nèi)產(chǎn)生的一類具有廣泛生物活性的類固醇化合物，在雌性和雄性動物的生殖系統(tǒng)發(fā)育及生殖活動中都具有重要作用。已有大量研究表明外源雌激素可誘發(fā)雄性生殖系統(tǒng)發(fā)育及功能異常，但其作用機(jī)理尚不清楚。雌激素發(fā)揮其生物學(xué)功能除依賴雌激素受體（ERs）外，也可能通過調(diào)節(jié)類固醇生成關(guān)鍵因子的表達(dá)進(jìn)而影響雄性的生殖功能。另外，雌激素對睪丸中NO生成的影響也可能是雌激素調(diào)控雄性生殖的一條途徑。以往研究多圍繞嚙齒類動物，不能完全代表家畜動物或其它動物

2、。同時，雄性動物幼年時期對雌激素的作用可能更為敏感。故本論文采用免疫組化和酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)（ELISA），探究了26日齡香豬睪丸中雌激素受體和內(nèi)皮型一氧化氮合酶（eNOS）表達(dá)的細(xì)胞類型，并檢測分析不同劑量雌二醇（E2）【對照組：0 mL/（d·頭），低劑量：0.1 mL/（d·頭），中劑量：0.5 mL/（d·頭），高劑量：2.5 mL/（d·頭）】對新生香豬生精小管細(xì)胞數(shù)量、雌激素受體表達(dá)、類固醇生成關(guān)鍵因子和一氧化氮合酶（NOS）

3、含量的影響。另外本研究還運(yùn)用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)研究不同濃度E2（10-6 mol/L，10-7 mol/L，10-8 mol/L，10-9 mol/L）對體外支持細(xì)胞增值的影響。通過研究得到如下結(jié)果：
　　1、雌二醇對幼年香豬睪丸生殖細(xì)胞和支持細(xì)胞數(shù)量的影響:通過免疫組化技術(shù)研究發(fā)現(xiàn)，不同劑量的雌二醇均能使香豬睪丸生殖細(xì)胞的數(shù)量顯著減少(P<0.05)，但劑量組之間生殖細(xì)胞的數(shù)量沒有顯著差異。相對于對照組與低劑量組，中劑量組與高劑量組中

4、生精小管支持細(xì)胞的數(shù)量也顯著降低(P<0.05)。通過對睪丸支持細(xì)胞體外培養(yǎng)，研究發(fā)現(xiàn)低濃度雌二醇(10-7 mol/L，10-8 mol/L，10-9 mol/L)對支持細(xì)胞的增值無顯著影響，而高濃度的雌二醇（10-6 mol/L，10-7 mol/L）可以抑制支持細(xì)胞的增值(P<0.05)。
　　2、雌二醇對幼年香豬睪丸中ERs表達(dá)的影響：通過免疫組化技術(shù)研究發(fā)現(xiàn)，幼年香豬睪丸中沒有ERα的表達(dá)，ERβ僅在初級生殖細(xì)胞的胞核中

5、表達(dá)，統(tǒng)計分析顯示生精小管中ERβ陽性細(xì)胞的表達(dá)率隨E2劑量的增大而顯著降低(P<0.05)。
　　3、雌二醇對幼年香豬睪丸中eNOS表達(dá)及NOS含量的影響：通過免疫組化方法發(fā)現(xiàn)，在幼年香豬睪丸中，eNOS僅存在于生殖細(xì)胞的胞質(zhì)中，在支持細(xì)胞及間質(zhì)細(xì)胞中均未見表達(dá)。經(jīng)數(shù)據(jù)分析高劑量組和中劑量組生精小管eNOS陽性細(xì)胞表達(dá)率顯著高于低劑量組和對照組(P<0.05)。進(jìn)一步通過酶聯(lián)測定免疫吸附法測定各劑量組睪丸中NOS的含量，結(jié)果顯示