半乳甘露聚糖檢測(cè)對(duì)侵襲性曲霉病的臨床價(jià)值及大鼠肺曲霉病模型建立.pdf

1、第一部分血清半乳甘露聚糖檢測(cè)對(duì)血液腫瘤患者侵襲性曲霉病的臨床價(jià)值研究
　　 目的:侵襲性曲霉病(IA)是由曲霉菌引起的在血液腫瘤患者中常見(jiàn)的嚴(yán)重機(jī)會(huì)性感染,早期滲斷困難且伴隨著較高的致死率。本研究旨在初步評(píng)價(jià)血清半乳甘露聚糖(GM)抗原檢測(cè)對(duì)于血液腫瘤患者IA的早期診斷和療效評(píng)判的價(jià)值。
　　 方法:選取2009年1月至2010年2月在我院血液科住院治療的符合國(guó)內(nèi)血液病/惡性腫瘤患者侵襲性真菌感染診斷標(biāo)準(zhǔn)宿主因素的127

2、例IA高?；颊叩?02份血清和不具有宿主因素的30例健康志愿者及其他患者的100份血清,采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附分析(ELISA)法測(cè)定血清樣本的GM濃度,同時(shí)收集患者的實(shí)驗(yàn)室、組織病理、影像學(xué)及治療效果等資料,依據(jù)我國(guó)侵襲性真菌感染的診斷標(biāo)準(zhǔn),評(píng)價(jià)GM測(cè)定前后診斷變化和抗真菌治療前后GM濃度變化的意義,并對(duì)該實(shí)驗(yàn)的各項(xiàng)評(píng)價(jià)指標(biāo)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
　　 結(jié)果:對(duì)血液腫瘤患者并發(fā)IA的GM檢測(cè)結(jié)果提示將單次I≥0.7或連續(xù)2次I≥0

3、.5作為陽(yáng)性界值時(shí),敏感度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值分別為92.3％、82.4％、57.1％和97.7％,與試劑盒規(guī)定的血清GM實(shí)驗(yàn)I≥1.5的陽(yáng)性界值相比靈敏度提高,特異度又無(wú)明顯降低,能夠有效區(qū)分臨床診斷和擬診兩個(gè)IA級(jí)別。加入GM實(shí)驗(yàn)后,臨床診斷病例組由10人增至19人。根據(jù)我們確定的陽(yáng)性界值標(biāo)準(zhǔn),GM實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性早于痰培養(yǎng)或涂片平均6.1±4.5d(1～11d),早于CT影像學(xué)證據(jù)平均7.2±5.5d(1～15d)。抗真菌治療

4、有效患者的GM水平隨著治療呈波動(dòng)性下降,無(wú)效患者GM水平不變或升高。通過(guò)對(duì)排除IA的患者進(jìn)行用藥分析發(fā)現(xiàn)靜脈應(yīng)用哌拉西林-他唑巴坦可使GM實(shí)驗(yàn)的假陽(yáng)性率升高。而對(duì)IA患者應(yīng)用棘白霉素類(lèi)抗真菌藥物后在治療早期血清GM水平會(huì)略有上升,總體呈下降趨勢(shì)。GM濃度與患者疾病的預(yù)后具有相關(guān)性。
　　 結(jié)論:血清GM抗原檢測(cè)是早期診斷IA的一種有效方法,在陽(yáng)性檢出率及檢出時(shí)間方面均明顯優(yōu)于典型影像學(xué)表現(xiàn)及直接微生物學(xué)證據(jù)。將單次I≥0.7或連

5、續(xù)2次I≥0.5作為陽(yáng)性界值比單用一種界值敏感度提高,特異度理想。在高危血液腫瘤患者中以GM實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性為起點(diǎn)搶先抗曲霉治療可降低IA病死率,患者經(jīng)有效治療后血清GM濃度可明顯降低,監(jiān)測(cè)血清GM濃度的動(dòng)態(tài)變化具有評(píng)判療效的價(jià)值。
　　 第二部分實(shí)驗(yàn)大鼠侵襲性肺曲霉病動(dòng)物模型的建立
　　 目的:建立大鼠免疫抑制侵襲性肺曲霉病動(dòng)物模型用于相關(guān)基礎(chǔ)與臨床研究。
　　 方法:SD大鼠腹腔注射不同劑量環(huán)磷酰胺或皮下注射一定劑量

6、地塞米松磷酸鈉,建立免疫抑制狀態(tài)后,在大鼠兩鼻孔接種煙曲霉SL1369,觀察各組在接種后不同時(shí)間點(diǎn)的行為狀態(tài)和肺組織病理變化。
　　 結(jié)果:三次環(huán)磷酰胺(75+60+60)mg/kg劑量注射組,中性粒細(xì)胞降低達(dá)到預(yù)期水平,連續(xù)5d低于200/μL,濃度約為107/ml的煙曲霉分生孢子懸液接種大鼠,接種后大鼠無(wú)死亡且全部發(fā)病,接種菌量適中;肺組織病理觀察在接種3d后曲霉孢子聚集并生成菌絲,肺組織有肉芽腫形成;5-7d時(shí)孢子大量繁殖