犬動(dòng)靜脈內(nèi)瘺模型的建立及初步試驗(yàn)研究.pdf

1、背景與目的:
　　血管通路是維持性血液透析(Maintenance hemodialysis，MHD)患者賴以生存的“生命線”，目前臨床上常用的血管通路有自體動(dòng)靜脈內(nèi)瘺(autologousarteriovenous fistula，AVF)、人造血管瘺（移植動(dòng)靜脈內(nèi)瘺）、中心靜脈導(dǎo)管三種類型，其中自體動(dòng)靜脈內(nèi)瘺因其使用壽命最長，并發(fā)癥最少而成為最主要的血管通路方式，NKF-KDOQI(National Kidney Founda

2、tion Disease OutcomesQuality Initiative)指南建議動(dòng)靜脈內(nèi)瘺應(yīng)作為MHD患者首選的血管通路[1]，其使用壽命及質(zhì)量直接關(guān)系到透析患者的生活質(zhì)量及預(yù)后。目前，AVF成熟障礙或者失功依然是患者住院的一個(gè)主要原因，其不僅為患者帶來巨大的痛苦，甚至威脅患者的生命，也同時(shí)為社會(huì)帶來巨大的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)[2]。許多因素均可致AVF成熟障礙和遲發(fā)失功，近來研究主要集中在內(nèi)膜增生(Vascular neointimahy

3、perplasia VNH)和異常血管重構(gòu)(vascular remodeling VR)。血管內(nèi)膜增生及血栓形成是造成AVF功能不良的主要原因。目前國內(nèi)外仍無有效的預(yù)防及治療血管內(nèi)膜增生的方法。本課題通過對(duì)犬的股靜脈和動(dòng)脈吻合后，監(jiān)測(cè)不同時(shí)間點(diǎn)血流量，血管直徑，血漿一氧化氮(nitric oxide，NO)和內(nèi)皮素-1(endothelin-1，ET-1)的變化，以及光鏡下血管內(nèi)膜增生和血管重構(gòu)的組織變化。驗(yàn)證犬股動(dòng)靜脈吻合后是否能夠

4、成為合適的研究AVF的動(dòng)物模型，同時(shí)研究了NO和ET-1在動(dòng)靜脈內(nèi)瘺建立之后血管重構(gòu)過程中及內(nèi)膜增生中發(fā)揮的作用，為將來進(jìn)一步干預(yù)措施的研究提供了理論依據(jù)。
　　材料與方法:
　　12只家犬于局麻下性股動(dòng)靜脈側(cè)側(cè)吻合建立動(dòng)靜脈內(nèi)瘺。分別于手術(shù)當(dāng)天及術(shù)后3天、7天、14天、28天采靜脈血應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法(Ezyme linkedimmunosorbent assay，Elisa)法測(cè)ET-1和NO濃度，同時(shí)用二維及彩色多普勒

5、超聲清晰顯示吻合口及其動(dòng)脈側(cè)和靜脈側(cè)主干血管，測(cè)量其內(nèi)徑、吻合口直徑，由超聲儀內(nèi)置軟件自動(dòng)計(jì)算出吻合口處血流量。6只于手術(shù)后7天處死，余6只術(shù)后28天處死。犬處死后，取動(dòng)靜脈內(nèi)瘺瘺口上下游1cm處股靜脈標(biāo)本，行HE染色，觀察股靜脈內(nèi)膜變化，對(duì)側(cè)股靜脈作為對(duì)照。應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件包對(duì)所有數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果:
　　(1)12例動(dòng)靜脈內(nèi)瘺吻合術(shù)均取得成功，術(shù)后7天吻合口處峰值血

6、流量達(dá)到364.77±31.00ml/min，動(dòng)靜脈內(nèi)瘺成熟良好。(2)股動(dòng)靜脈吻合術(shù)后3天，較未吻合前明顯擴(kuò)張，之后呈時(shí)間增長趨勢(shì)。(3)術(shù)后3天血流量較未吻合前明顯增加，呈時(shí)間增長趨勢(shì)，至21天時(shí)血量達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)。(4)術(shù)后3天NO濃度明顯升高，與各時(shí)間段NO濃度比均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)，其他各時(shí)間段之間比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)，術(shù)后14天ET-1濃度達(dá)到最高，術(shù)后7、14、21天ET-1均高于術(shù)前水平，差異具有統(tǒng)

7、計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，其他組之間相互比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。(5)術(shù)后7天內(nèi)膜厚度為25.32±3.96um，并隨時(shí)間的延長而加重，28天時(shí)內(nèi)膜厚度為195.77±27.51um，
　　結(jié)論:
　　(1)犬股動(dòng)靜脈內(nèi)瘺模型建立后，內(nèi)瘺處血流量明顯增加，動(dòng)靜脈擴(kuò)張，內(nèi)膜增生明顯，是一種較適合進(jìn)行動(dòng)靜脈內(nèi)瘺相關(guān)研究的動(dòng)物模型。(2)術(shù)后3天NO濃度明顯升高，有利于血管擴(kuò)張，利于動(dòng)靜脈內(nèi)瘺的成熟。術(shù)后7天ET-1