尼美舒利聯(lián)合西妥昔單抗對結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞株凋亡及相關(guān)基因的影響.pdf

1、目的：研究COX-2抑制劑尼美舒利和EGFR單克隆抗體西妥昔單抗（Cetuximab，C225）聯(lián)合對結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞增殖和凋亡的影響及其相關(guān)機(jī)制。
　　 方法：選用不同濃度的西妥昔單抗（10～2000μg/ml）和尼美舒利（50～400μmol/L）單獨(dú)或聯(lián)合作用于結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞，MTT法檢測細(xì)胞增殖狀態(tài)；倒置顯微鏡及AO/EB染色法觀察細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)改變；流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡率；RT-PCR檢測COX-2、NA

2、G-1 mRNA的表達(dá)；Western Blot檢測EGFR通路下游相關(guān)蛋白Akt的磷酸化活性。
　　 結(jié)果：尼美舒利與西妥昔單抗聯(lián)合作用于HT-29細(xì)胞48h，對細(xì)胞的生長抑制率（72.8±2.3）％明顯高于尼美舒利組（51.8士1.8）％。倒置顯微鏡下及AO/EB染色觀察到聯(lián)合組HT-29細(xì)胞發(fā)生典型的凋亡形態(tài)學(xué)改變，流式凋亡檢測顯示48h聯(lián)合組的凋亡率顯著高于尼美舒利、西妥昔單抗組（P<0.05）。西妥昔單抗下調(diào)COX-2