EGCG抑制結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞生長(zhǎng)及預(yù)防血管生成的作用機(jī)制.pdf

1、目的:
　　 探討表沒食子兒茶素沒食子酸酯(Epigallocatechin-3-gallate，EGCG)對(duì)人結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞生長(zhǎng)的影響及抑制血管生成的相關(guān)機(jī)制。
　　 方法:
　　 (1)采用MTT法檢測(cè)對(duì)照組及濃度分別為25、50、100μg/ml的EGCG分別作用于結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞株24h、48h、72h后，對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響;
　　 (2)應(yīng)用半定量RT-PCR檢測(cè)對(duì)照組及濃度分別為25、

2、50、100μg/ml的EGCG作用于結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞株24h后，細(xì)胞中轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(Transformsgrowth factorsβ1，TGF-β1)、15-羥基前列腺素脫氫酶(15-Hydroxyprostaglandindehydrogenase，15-PGDH)、環(huán)氧化酶-2（Cyclooxygenase-2，COX-2）、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（Vascular endothelial growth factor，VEGF

3、）mRNA的表達(dá)情況;
　　 (3)應(yīng)用Western blot檢測(cè)對(duì)照組及濃度分別為25、50、100μg/ml的EGCG作用于結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞株24h后，細(xì)胞中TGF-β1、15-PGDH、COX-2、VEGF蛋白的表達(dá)情況。使用SPSS19.0軟件對(duì)所有數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，采用單因素方差分析(ANOVA)及SNK兩兩比較法，P＜0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果:
　　 (1)MTT顯示EGCG抑制HT

4、-29細(xì)胞的生長(zhǎng)，對(duì)照組各時(shí)間抑制率均為0，濃度為25μg/ml EGCG組0、24h、48h、72h抑制率分別為0、8.68±1.53％、19.42±2.31％、28.26±2.65％，濃度為50μg/ml EGCG組0、24h、48h、72h抑制率分別為0、16.03±1.72％、30.57±1.59％、39.43±2.15％，濃度為100μg/mL EGCG組0、24h、48h、72h抑制率分別為0、23.82±2.49％、40.

5、16±2.36％、49.07±1.96％，顯示隨著濃度的增加及時(shí)間的延長(zhǎng)抑制作用逐漸增強(qiáng)，各組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05);
　　 (2)半定量RT-PCR顯示TGF-β1、15-PGDH mRNA表達(dá)量隨著EGCG濃度的增加而增加，COX-2、VEGF mRNA表達(dá)量隨著EGCG濃度的增加而下降，各組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＜0.05）;
　　 (3) Western blot顯示TGF-β1、15-PGDH蛋白的