EGCG作為一種有效的STAT3信號傳導通路抑制劑的研究.pdf

1、EGCG作為一種有效的作為一種有效的STAT3信號傳導通信號傳導通路抑制劑的研究路抑制劑的研究EGCGaneffectiveantagonistofSTAT3signalingpathway學科專業(yè)：微生物與生化藥學研究生：嚴爾福指導教師：周立軍副教授天津大學藥學院二零一三年六月3摘要原發(fā)性肝癌是幾種最為常見的惡性腫瘤之一，其患者有較低的生存率。信號傳導轉錄激活因子3(STAT3)是一種新被發(fā)現(xiàn)的致癌基因，它能夠促進肝癌細胞的生長，繁殖

2、，死亡和進展。在本研究中，我們從多種角度探究了表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)作為一種潛在的STAT3抑制劑的應用和相關機理。此前的一些研究也已表明EGCG是一種廣譜的抗癌化合物。有相關報道其能夠阻滯幾種細胞因子的活化，從而阻斷多種下游信號轉導通路如STAT3JAK信號通路。當應用藥物干預BEL7402和QGY7701細胞模型后，我們應用MTT體外實驗證明了EGCG能夠強烈的抑制這兩種細胞系的增值和遷移。EGCG能夠誘導體外肝癌細胞

3、呈現(xiàn)一個很明顯的濃度依賴性抑制效果。兩者的半數(shù)抑制劑濃度(IC50)分別為：BEL7402細胞系大約為55μM，QGY7704細胞系大約為35μM。我們還應用流式細胞儀技術證明了EGCG能夠通過干預STAT3信號通路誘導肝癌細胞發(fā)生凋亡。用20μM40μM80μM160μM干預BEL7402細胞24小時后凋亡率分別為4.4%6.7%8.5%和35.6%。相同的條件下，QGY7704細胞24小時后凋亡率分別為9.1%15.3%22.7%和

4、50.6%(P0.05)。這些結果證明了QGY7704對于EGCG的干預作用相比于BEL7402細胞更為敏感。同時，EGCG能夠明顯降低磷酸化STAT3的表達量，但是對于總STAT3表達量影響不是很明顯。RTPCR的結果證明EGCG能夠下調STAT3調控基因表達，從而有效抑制肝癌細胞遷移，入侵和增值。再者，我們應用分子對接的方式闡釋了STAT3和EGCG的相互作用。EGCG中的C=O作為氫的受體同時與GLU612中的NH以及SER613

5、中的OH形成氫鍵，這種結構也形成了較為牢固的相互作用；EGCG中的一個芳環(huán)上的氫與STAT3中ARG609中的一個HH2還形成一般的氫鍵。除此之外，EGCG的其余部分主要以范德華力與STAT3的疏水袋（LYS591、GLU594、ARG609、SER611、GLU612、SER613、THR620、VAL637、GLU638、PRO639）產生相互作用。這些結果和PTPCR的結果一樣，證明了EGCG能夠從分子水平上阻滯STAT3活化?？?/p>