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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
1.探討創(chuàng)傷性腦損傷后大鼠海馬CA1區(qū)神經(jīng)元及膠質(zhì)纖維酸性蛋白(glialfibrillaryacidicprotein,GFAP)陽性星形膠質(zhì)細(xì)胞的變化。
2.觀察早期應(yīng)用依達(dá)拉奉對(duì)創(chuàng)傷性腦損傷后大鼠海馬CA1區(qū)神經(jīng)元、GFAP陽性星形膠質(zhì)細(xì)胞及神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響。
方法:選用健康雄性Spraque-Dawley大鼠36只,體重280g~300g左右作為模型動(dòng)物。按照改進(jìn)的Feeney
2、自由落體損傷裝置制作大鼠創(chuàng)傷性腦損傷(traumaticbraininjury,TBI)模型。隨機(jī)分成:假手術(shù)組(Sham),生理鹽水組(NS),依達(dá)拉奉治療組(edaravone,EDA)。治療組于腦損傷30分鐘后腹腔注射藥物,劑量為3.0mg/Kg,1次/12h,連續(xù)給藥3天。假手術(shù)組和生理鹽水組在相同時(shí)間內(nèi)給予等量生理鹽水注射。全部大鼠在3天后處死,經(jīng)心灌注固定,斷頭取腦,做冠狀面的腦切片,選擇兩側(cè)海馬切片。進(jìn)行HE染色并用神經(jīng)元
3、密度(neurnaldensity,ND)評(píng)價(jià)海馬CA1區(qū)神經(jīng)元損傷程度,星形膠質(zhì)細(xì)胞免疫組化染色并進(jìn)行GFAP陽性星形膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)目的定量分析和陽性細(xì)胞GFAP表達(dá)的積分光密度(integralopticaldensity,IOD)的半定量分析。原位缺口末端標(biāo)記(Terminaldeoxynucleotidyltransferease-mediatedbiotinylateddeoxyuridinetriphosphatenickend
4、labeling,TUNEL)法研究海馬CA1區(qū)神經(jīng)細(xì)胞凋亡情況。
結(jié)果:
1.與假手術(shù)組比較,生理鹽水組海馬CA1區(qū)神經(jīng)元絕大部分變性壞死,神經(jīng)元密度明顯降低,GFAP陽性星形膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)目增多,GFAP染色較深。與生理鹽水組比較,依達(dá)拉奉組海馬CA1區(qū)存活神經(jīng)元增多,可見少量神經(jīng)元變性壞死。GFAP陽性星形膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)目明顯增多,染色較深,突起增粗,增長和分支增多。
2.生理鹽水組海馬CA1區(qū)神
5、經(jīng)元密度為8.90±2.14;依達(dá)拉奉組為18.63±3.55,與生理鹽水組相比,差異具有顯著性(p<0.05)。生理鹽水組海馬CA1區(qū)GFAP陽性星形膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)目和陽性星形膠質(zhì)細(xì)胞的積分光密度值分別為6.99±2.10和22.35±6.15;依達(dá)拉奉組為12.11±2.34和33.24±8.17,生理鹽水組相比,差異具有顯著性(p<0.05)。
3.TUNEL檢測(cè)發(fā)現(xiàn)生理鹽水組可見大量凋亡細(xì)胞,依達(dá)拉奉組也可見凋亡細(xì)胞,
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